[发明专利]一种通过模拟体内消化过程制作的粪便移植菌的培养基的方法在审
申请号: | 202210254520.X | 申请日: | 2022-03-15 |
公开(公告)号: | CN114525226A | 公开(公告)日: | 2022-05-24 |
发明(设计)人: | 陈晓东;王娟;吕禾;丛海花;廖振锴 | 申请(专利权)人: | 陈晓东 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20 |
代理公司: | 苏州市中南伟业知识产权代理事务所(普通合伙) 32257 | 代理人: | 杨慧林 |
地址: | 215000 江苏省苏州市吴*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 通过 模拟 体内 消化 过程 制作 粪便 移植 培养基 方法 | ||
1.一种通过模拟体内消化过程制作的粪便移植菌的培养基的方法,其特征在于,包括以下步骤:
S1:将食物与模拟胃液混合得到混合液1,将混合液1的pH值调至1.5-6.5,混合反应得到胃消化产物;所述食物选自蛋白质、糖类和矿物质中的一种或多种;
S2:将S1中所得胃消化产物的pH值调至预设值6.5-8.5,得到混合液2,并与模拟肠液混合,混合反应得到肠消化产物;
S3:将S2中所得肠消化产物进行灭菌灭活除杂,得到所述培养基。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤S1中,食物与模拟胃液的质量比为1:2-2:1。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤S1中,所述模拟胃液中含有胃蛋白酶或/和胃脂肪酶,且所述胃蛋白酶含量为400-4000U/mL;所述模拟胃液的pH值为1.5-5。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤S1中,混合反应条件:搅拌、震荡、蠕动或挤压的速率为50-150rpm,反应温度为33-40℃,反应时间1-4h。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤S2中,所述模拟肠液中含有胰蛋白酶,还可以包括其他复合酶或胆盐,所述其他复合酶选自糜蛋白酶、胰脂肪酶和胰淀粉酶中的一种或多种,其中胰蛋白酶含量为150-250U/mL;所述模拟肠液的胆盐含量0-40mM,所述模拟肠液的pH值为6.5-8.5。
6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤S2中,混合反应的条件:搅拌、震荡、蠕动或挤压的速率为50-150rpm,反应温度为33-40℃,反应时间为1-6h。
7.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤S2中,当所述模拟肠液含有胆盐时,则需要去除所得肠消化产物中的胆盐;去除胆盐的方法为透析、离心或过滤。
8.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤S3中,所述灭菌灭活的条件:温度为80-121℃、时间为15-30min。
9.权利要求1-8中任一项所述的方法制备得到的粪便移植菌的培养基。
10.权利要求9中所述的培养基在培养粪便移植菌中的应用。
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