[发明专利]一种基于微生物群体感应猝灭的MBR膜污染控制方法

权利要求书

1.一种基于微生物群体感应猝灭的MBR膜污染控制方法，其特征在于：包括以下操作步骤：

S1：准备材料：中空纤维膜、生活污水、活性污泥、M9培养基、Tris缓冲盐溶液、磷酸缓冲盐溶液；

S2：使用MBR反应器进行反应：在进行使用时，需保证温度约为20-26度，每天将经过1mm筛网过滤后的生活污水加入到高位水箱中，高位水箱中的原水进入各恒水位水箱中再分配到反应器中，再由蠕动泵抽吸出水，将压力变送器连接在膜组件与抽吸蠕动泵之间，精确测量、采集各MBR中的跨膜压差数据，由单片机收集、处理压力变送器信号并传送至电脑记录数据，数据采集频率为1分钟/次，MBR中膜组件完全污染后，跨膜压差70kPa时，将其取出，先用自来水将膜表面的污染物冲洗下来，再用含有0.01mol/L的NaOH及200p pm的次氯酸钠的化学清洗液浸泡1-2h，经化学清洗后可重复使用；

S3：将活性污泥以1％v/v接种至20mL以GCL为单以一碳源的M9培养基中，在30℃下150rpm摇床中培养5-7天后，待菌液变浑浊，将其转接至新的以GCL为单一碳源的M9培养基中，培养基为20mL，继续培养，经过三次转接培养之后，富集完成，将所得细菌保存于4℃冰箱中；

S4：将GCL富集菌或活性污泥用50mmol/L pH＝7.0的Tris缓冲盐溶液清洗，离心机清洗的机的规格为7000rpm，10min，4℃离心，弃去上清液，再加入TRIS缓冲盐清洗两次，再用TRIS缓冲盐将菌液的浓度调至600nm处吸光度为1.0，用TRIS缓冲盐将1g/L的AHL储备液稀释至400nmol/L，向1.5mL离心管中加入100uL以上菌液及等体积的400nmol/L的AHL溶液，重复配制几份以供后续降解实验中连续取样，将100uL纯水加入等体积的400nmol/L的AHL中以作为空白对照，将活性污泥煮沸10min后，调节OD600＝1.0，将混合液在30℃、120rpm的摇床中培养，定时取出一份混合液置于99℃水浴中10min，以灭活细菌，用0.45um的滤膜将细菌滤去后将样品保存于4℃中，此时即可完成对MBR膜的污染控制。

2.根据权利要求1所述的一种基于微生物群体感应猝灭的MBR膜污染控制方法，其特征在于：所述实验中采用的中空纤维膜其材质为聚偏四氟乙烯，孔径为0.01um，膜丝外径为1.85mm，单根膜丝长度为60cm，所述生活污水取水后两天之内应用完，使用前，先用1mm的筛子将污水中的颗粒物过滤掉，再向水中加入255mg/L的NaHCO₃，以调节碱度。

3.根据权利要求1所述的一种基于微生物群体感应猝灭的MBR膜污染控制方法，其特征在于：所述M9培养基配置时先配制5×M9盐，将92.39g的Na₂HPO₄-12H₂O、15g的KH₂PO₄、2.5g的NaC1及5.0g的NH₄Cl，溶解于800mL的蒸馏水中，充分溶解后定容至1000mL，用预先配制好的NaOH溶液将其pH调节至7.4，121℃20min灭菌后，于常温下保存，取约700mL的灭菌水，加入200mL配制好并灭菌的5×M9盐，加入2mL已灭菌的1mol/L的MgSO₄溶液，加入2mL GCL，加入100uL已灭菌的1mol/LCaCl₂，若加入CaCl₂时溶液仍是热的会出现沉淀，这时剧烈摇晃直至沉淀溶解即可，用已灭菌的蒸馏水定容至1000mL，常温下保存，以待使用。

4.根据权利要求1所述的一种基于微生物群体感应猝灭的MBR膜污染控制方法，其特征在于：所述Tris缓冲盐溶液配置时将6.05g三羟甲基氨基甲烷及8.76gNaCl溶于800mL去离子水中，用1mol/L的HC1溶液将其pH调至7.0，定溶于1L，121℃20min灭菌后，常温下保存，以备使用。

5.根据权利要求1所述的一种基于微生物群体感应猝灭的MBR膜污染控制方法，其特征在于：所述磷酸缓冲盐溶液配置时首先配置10x的磷酸缓冲盐溶液储备液，将80g的NaC1、2g的KCI、35.8g的Na₂HPO₄·12H₂O、2.4g的KH₂PO₄溶于800mL水中，充分溶解后定容于1000mL，调节pH至7.4，常温下保存。