[发明专利]一种血清1型马立克病病毒MEQ单克隆抗体、制备方法及应用

说明书

本发明公开了一种抗血清1型马立克病病毒MEQ蛋白单克隆抗体、制备方法及应用。所述抗MDV‑1特异性MEQ蛋白单克隆抗体由鼠源单克隆抗体杂交瘤细胞株meq‑2A9‑B12产生，该细胞株已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号：CGMCC No:23023，该单克隆抗体亚型为IgG2b，轻链型为Kappa，其重链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示，轻链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。本发明分泌的单克隆抗体2A9‑B12可用于MDV‑1不同致病型毒株的IFA和Western blot等免疫学检测分析，还可以鉴别区分MDV‑2和MDV‑3毒株，适用于临床疑似病例中不同血清型MDV流行毒株的鉴别诊断。本发明解决了目前国内缺乏抗MDV‑1 MEQ蛋白特异性单抗的“卡脖子”问题，为MD后续研究及诊断试剂研发提供了关键核心试剂。

技术领域

本发明涉及一种血清1型马立克病病毒MEQ单克隆抗体、制备方法及应用，属于动物免疫学技术领域。

背景技术

鸡马立克病(Marek’s disease，MD)是由马立克病病毒(Marek’s disease virus，MDV) 早期感染雏鸡引发的一种重要的免疫抑制病及肿瘤病。MDV早期感染宿主后产生严重的免疫抑制，是临床禽病疫苗免疫预防效果不佳的重要因素之一，长期以来一直困扰着我国养禽业的健康发展。同时，MDV感染自然宿主后会诱发内脏肿瘤和大批死亡，导致全球养禽业年均直接经济损失约10-20亿美元。MDV诱发宿主肿瘤的发生可以用疫苗进行有效的免疫预防，是世界上首个可以用疫苗成功预防致瘤性病毒引发癌症的例子，但是近年来随着MD疫苗在鸡群中的广泛应用，在长期的免疫压力选择下，MDV流行毒株的毒力正不断增强和变异，MD 疫情在全球范围内仍不断暴发。

MDV共有3种不同的血清型：血清1型(MDV-1)、血清2型(MDV-2)和血清3型(MDV-3，即火鸡疱疹病毒HVT)，其中只有MDV-1具有致病性和致瘤性。根据致病性的不同，MDV-1 流行毒株又可分为温和毒(Mild MDV，mMDV)、强毒(Virulent MDV，vMDV)、超强毒(Veryvirulent MDV，vvMDV)以及特超强毒(Very virulent plus MDV，vv+MDV)。

MDV病毒基因组为线性双股DNA，全长约180kb。主要由一个长独特序列区(Uniquelong，UL)和一个短独特序列区(Unique short，US)构成，在两个独特序列区两侧分别是两个序列完全相同的反转重复序列区：长末端重复序列(Terminal repeat long，TRL)和长内部重复序列(Internal repeat long，IRL)以及短末端重复序列(Terminal repeat short，TRS)和短内部重复序列(Terminal repeat short，IRS)，独特序列区中编码的病毒基因与其它疱疹病毒具有高度保守性，而MDV特异性的病毒基因则主要位于反转重复序列区 TR/IR中。