[发明专利]一种双回文DNAzyme纳米线传感器及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种双回文DNAzyme纳米线传感器，其特征在于，所述双回文DNAzyme纳米线传感器由若干个双回文DNAzyme纳米线单体在回文序列作用下通过回文序列的倒置读性组装形成；

所述双回文DNAzyme纳米线单体包括双回文酶链和底物链；

荧光基团标记于底物链，猝灭基团标记于双回文酶链；

双回文酶链的5’端和3’端各连接有一段回文序列。

2.根据权利要求1所述的一种双回文DNAzyme纳米线传感器，其特征在于，双回文酶链两端的回文序列的碱基数不少于10nt；双回文酶链两端的回文序列中的碱基序列不同。

3.一种双回文DNAzyme纳米线传感器的制备方法，其特征在于，在PCR管中加入底物链、双回文酶链、HEPES缓冲液，混合均匀后在90～100℃下加热变性，以恒定的降温速率降温至25℃，保持25℃条件下30min。

4.根据权利要求3所述的一种双回文DNAzyme纳米线传感器的制备方法，其特征在于，所述双回文酶链的浓度为1～5μmol/L。

5.根据权利要求3所述的一种双回文DNAzyme纳米线传感器的制备方法，其特征在于，恒定的降温速率为1min降低1℃。

6.如权利要求1-2中任一所述的一种双回文DNAzyme纳米线传感器在重金属检测中的应用，其特征在于，包括以下步骤：

S1:制备双回文DNAzyme纳米线传感器：通过双回文DNAzyme纳米线单体形成双回文DNAzyme纳米线传感器，双回文DNAzyme纳米线单体的DNAzyme序列由待检测重金属酶链序列所确定；

S2:构建检测样本库：向制备好的DNAzyme纳米线传感器中加入重金属离子、HEPES缓冲液，混合均匀后在30～40℃下孵育30min～60min；

S3:检测荧光信号：向S2孵育完成的产物中加入溶剂，混合均匀后转移至比色皿中进行荧光检测；

S4：建立不同浓度的重金属离子样品检测标准曲线；

S5：对实际样品进行定量检测：将未知浓度的重金属离子作为检测目标，通过S1、S2、S3进行荧光信号检测，将得到的荧光信号代入S4建立的标准曲线中，计算出实际样品中重金属离子的浓度。

7.根据权利要求4所述的一种双回文DNAzyme纳米线传感器在重金属检测中的应用，其特征在于，所述S3荧光检测的参数为：

激发和发射狭缝宽度设置为10nm；

PMT探测器电压设置为650V；

荧光基团的激发波长为490nm，发射波长的收集范围为500nm～650nm。

8.根据权利要求4所述的一种双回文DNAzyme纳米线传感器在重金属检测中的应用，其特征在于，所述S4建立不同浓度的重金属离子样品检测标准曲线的具体步骤为：在S2中加入不同浓度的同种重金属离子，反应后通过S3检测荧光信号，以不同浓度的重金属离子为横坐标，以输出的荧光信号为纵坐标，建立不同浓度的重金属离子样品检测的标准曲线。