[发明专利]金粟兰内酯B在制备NLRP3炎症小体抑制剂中的应用

说明书

本发明涉及天然药物领域，本发明公开了金粟兰内酯B在制备NLRP3炎症小体抑制剂中的应用，其能够抑制ASC斑点形成，以及后续caspase‑1 p20的活化和IL‑1β的分泌。金粟兰内酯B可作为为治疗炎症小体异常活化相关疾病的潜在药物。

技术领域

本发明涉及天然药物领域，具体涉及金粟兰内酯B在制备NLRP3炎症小体抑制剂中的应用。

背景技术

NLRP3炎症小体在先天免疫、炎症和多种慢性炎症相关疾病中发挥重要作用，但其激活机制复杂。越来越多的证据表明NLRP3炎症小体是一种很有前途的治疗炎症性疾病的靶点。到目前为止，研究的最好、最具特征的炎症小体是NLRP3炎症小体，NLRP3炎症小体是一种存在于细胞内的多蛋白复合物，由NLRP3蛋白，凋亡相关斑点样蛋白(ASC)，效应分子半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶1(pro-Caspase-1)和NEK7蛋白四部分组成。ASC作为一种接头蛋白，能够连接上游的NLRP3受体蛋白和下游的pro-Caspase-1，三种蛋白紧密连接从而保证了NLRP3炎症小体的免疫活性和生物学功能。NLRP3炎症小体的激活依赖于两种启动信号:第一种启动信号主要由Toll样受体(TLR)/核因子κB(NF-κB)通路所诱导；第二种启动信号是由一系列病原相关分子模式和损伤相关分子模式所激活。目前，关于第一种启动信号的激活途径研究较多，其作用机制相对清楚。第二种启动信号的作用途径如下:细胞外ATP结合至细胞表面的P₂X₇受体，打开其控制的离子通道，激活下游的NLRP3炎症小体。NLRP3炎症小体被激活后，可招募ASC和Pro-Caspase-1，促使自身寡聚化，引起Pro-Caspase-1自我剪切活化，进而裂解pro-IL-1β，pro-IL-18形成成熟的IL-1β，IL-18，从而发挥炎症效应。NLRP3炎症小体如果被过度激活，过量释放的IL-1β和IL-18等细胞因子以及所产生的炎症瀑布式反应将会对机体产生致命性损害。因此，NLRP3炎症小体的激活必须准确地控制和调节。炎症小体作为固有免疫的重要组成部分，其异常活化和功能失调与多种获得性炎性疾病和自身免疫病的病理过程密切相关目前研究发现，溃疡性结肠炎、阿尔茨海默病、2型糖尿病、骨性关节炎、腹膜炎、急性肺损伤、动脉粥样硬化、痛风性关节炎、非酒精性脂肪性肝炎等都与炎症小体的异常活化密切相关。

目前在治疗获得性炎性疾病和自身免疫病方面，并未有相关靶向NLRP3炎症小体药物的临床应用，因此开发炎症小体抑制剂，抑制炎症小体的异常活化，将有利于上述疾病的治疗并为其提供新的治疗途径。

发明内容

本发明公开了一类倍半萜化合物新的作用机制以及新的适应症，提供了一类倍半萜类化合物的药物新用途。

金粟兰内酯B的应用为如下(a)或(b)：

(a)在制备NLRP3炎症小体抑制剂中的应用；

(b)在抑制NLRP3炎症小体致病性疾病中的应用。

以下是对本文详细描述的主题的概述。本概述并非是为了限制权利要求的保护范围。

本发明的乌药烷型化合物自草珊瑚中提取、分离、纯化与衍生化得到，名为Chloranthalactone B(金粟兰内酯B)，分子式C₁₅H₁₆O₃，分子量244.29，白色粉末，溶于甲醇，DMSO。本发明保护金粟兰内脂B，如下图所示。

金粟兰内酯B的提取分离流程：草珊瑚干燥粉碎，95％乙醇回流提取4次/3h，浓缩得浸膏。水悬浮后石油醚脱脂，二氯甲烷萃取，浓缩后二氯甲烷层浸膏经HW-40C凝胶分离得四部分：A-D。其中C段经MCI柱分离，金粟兰内酯B由70％甲醇/水冲出，如图1所示。

本发明人发现金粟兰内酯B可以抑制LPS和ATP、尼日利亚菌素、尿酸钠结晶分别联用刺激地NLRP3炎症小体的激活，能够显著抑制炎症小体的活化，可用于制备相关疾病的药物。