[发明专利]一种肺炎支原体检测装置及检测方法

说明书

本发明涉及基因工程技术领域，提供一种肺炎支原体检测装置及检测方法，包括外壳、进出样模块、反应容器、供料模块、加热模块、荧光检测模块和控制模块，利用本申请实施例所提供的检测装置，可以将扩增产物与LbCas12a‑gRNA复合物混合并进行扩增循环，若存在荧光效应判断，则样本中存在肺炎支原体。该方法可在短时间内完成肺炎支原体的检测，仅较短时间即可检测是否存在肺炎支原体序列。此装置可以便于携带和保存，能满足快速检测的需要。

技术领域

本发明涉及基因工程技术领域，具体而言，涉及一种肺炎支原体检测装置及检测方法。

背景技术

肺炎支原体是最小的原核微生物，无细胞壁，具有高度的多态性，也是引起非典型肺炎和社区获得性肺炎(CAP)的常见病原体。临床症状主要表现为咳嗽、发热、咽喉痛和肌肉痛，与其他呼吸道病原体如金黄色葡萄球菌、鲍曼不动杆菌、流感病毒和SARS-CoV-2相似，极易误诊。

传统的肺炎支原体的鉴定包括分离培养、免疫学检测和分子生物学检测。分子生物学是检测肺炎支原体最重要的方法，包括聚合酶链反应(PCR)、实时荧光定量PCR(qPCR)和等温扩增技术等。qPCR是早期快速检测肺炎支原体核酸的主要方法，能进行相对和绝对定量，且比普通PCR具有更高的灵敏度和特异性，但其对仪器、环境和实验室人员的要求较高。为了实现肺炎支原体的早期快速诊断，亟待提供一种肺炎支原体检测方法及检测装置。

发明内容

本发明的目的是提供一种肺炎支原体检测装置及检测方法，以至少部分地解决上述的技术问题。

根据本发明的第一方面，提供一种肺炎支原体检测装置，包括外壳、进出样模块、反应容器、供料模块、加热模块、荧光检测模块和控制模块，其中：

所述进出样模块、所述反应容器、所述供料模块、所述加热模块、所述荧光检测模块和所述控制模块均设置于所述外壳内，所述反应容器具备加热腔，所述供料模块的供料泵伸入所述加热腔内，所述加热腔的进出样开口设置于所述外壳上，所述进出样模块能够通过所述进出样开口进入并放置于所述加热腔内，所述反应容器的外壁与所述加热模块相互贴合；

所述进出样模块包括多个反应管，所述反应容器的外壁及所述反应管均由透明材料制成；

所述供料模块通过供料泵为所述进出样模块加料，所述荧光检测模块正对所述反应容器及所述进出样模块；

所述控制模块与所述供料模块、所述加热模块、所述荧光检测模块均相连。

优选地，所述加热模块至少具备35℃和37℃两个恒温温度。

优选地，所述供料泵包括中空的伸缩臂和泵体，所述伸缩臂通过所述泵体与所述供料模块的储藏罐相连，所述泵体用于通过所述伸缩臂将药剂从储藏罐内泵出。

优选地，所述供料模块至少用于分步添加所述正向引物、所述反向引物和所述LbCasa-gRNA复合物。

优选地，所述反应容器还包括保护盖，所述保护盖与所述加热腔形状配合并能够封闭所述进出样开口。

根据本发明的另一方面，提供一种利用如上所述的肺炎支原体检测装置进行肺炎支原体检测方法，包括下列步骤：

在所述进出样模块(2)内通过ERA扩增样本序列，所述样本序列包括靶序列或目的序列，得到扩增产物；

选取gRNA序列，基于所述gRNA序列制备LbCas12a-gRNA复合物，所述LbCas12a-gRNA复合物包含荧光探针；

通过所述供料模块(4)向所述进出样模块(2)内添加所述LbCas12a-gRNA复合物，在所述进出样模块(2)内将所述扩增产物与所述LbCas12a-gRNA复合物混合并进行扩增循环，若所述荧光检测模块(6)判断存在荧光效应，则判断所述样本中存在肺炎支原体。