[发明专利]一种乏氧响应型炔-胺点击聚合的细胞内聚合方法及其应用

权利要求书

1.一种乏氧响应型炔-胺点击聚合的细胞内聚合方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)将细胞在二元硝基化合物溶液中进行乏氧培养；

(2)将步骤(1)乏氧培养后的细胞转至二元炔基化合物溶液中进行常氧培养；

(3)步骤(2)常氧培养后的细胞转至培养基中常氧培养，即实现乏氧响应型炔-胺点击聚合的细胞内聚合；

步骤(1)中所述乏氧培养的氧气浓度为1～20％。

2.如权利要求1所述的乏氧响应型炔-胺点击聚合的细胞内聚合方法，其特征在于，所述二元硝基化合物的结构式为

所述二元炔基化合物的结构式为

式(Ⅰ)～(Ⅲ)中，R₁，R₃选自(1)～(18)中的任意一种；R₂，R₄选自氢原子或(19)～(22)中的任意一种或几种：

其中，m、h、k为1～100整数；X选自N、P、O、S或Si元素；*表示取代位置。

3.如权利要求2所述的乏氧响应型炔-胺点击聚合的细胞内聚合方法，其特征在于，所述二元硝基化合物溶液的浓度为0.1μmol/L～150mmol/L。

4.如权利要求3所述的乏氧响应型炔-胺点击聚合的细胞内聚合方法，其特征在于，所述细胞的浓度为1×10⁵～2×10⁵个/mL。

5.如权利要求4所述的乏氧响应型炔-胺点击聚合的细胞内聚合方法，其特征在于，所述细胞为肿瘤细胞。

6.如权利要求5所述的乏氧响应型炔-胺点击聚合的细胞内聚合方法，其特征在于，所述二元炔基化合物溶液的浓度为1μmol/L～100mmol/L。

7.如权利要求6所述的乏氧响应型炔-胺点击聚合的细胞内聚合方法，其特征在于，所述二元硝基化合物溶液的溶剂、二元炔基化合物溶液的溶剂和步骤(3)中所述培养基独立的为PBS磷酸缓冲盐溶液、HEPES缓冲液、DMEM细胞培养基和1640细胞培养基中的一种。

8.如权利要求1～7任一项所述的乏氧响应型炔-胺点击聚合的细胞内聚合方法，其特征在于，步骤(1)中所述乏氧培养和步骤(2)、(3)中所述常氧培养的温度独立的为4～37℃，时间独立的为1～600min。

9.一种权利要求1～8任一项所述的乏氧响应型炔-胺点击聚合的细胞内聚合方法实现细胞荧光成像的应用。