[发明专利]一株粘质沙雷氏菌及其在生产柚苷酶中的应用

说明书

本发明公开了一株粘质沙雷氏菌及其在生产柚苷酶中的应用，属于微生物技术领域。该菌株命名为粘质沙雷氏菌（Serratia marcescens）C10，其于2022年1月19日保藏于广东省广州市越秀区先烈中路100号大院59号楼的广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC No:62223。该菌株为一株新型可以产柚苷酶的菌株，能高效催化水解柚皮苷，所产柚苷酶对柚皮苷水解效率为90%左右，所产柚苷酶活性及稳定性较好。因此，粘质沙雷氏菌C10对不同柑橘类果汁脱苦加工及风味改良上具有重要应用潜力。

技术领域

本发明属于微生物技术领域，具体涉及一株粘质沙雷氏菌及其在生产柚苷酶中的应用。

背景技术

随着我国食品饮料加工行业的快速发展和人们对健康饮食品质要求的不断提高，橙汁等富含黄酮类化合物的饮品受到消费者广泛青睐，然而，橙汁中富含大量的橙皮苷、柚皮苷等黄酮类化合物，导致其苦味浓郁，严重影响口感和销量。一方面，柚苷酶主要含有两种酶，一种是α-L-鼠李糖苷酶，可使苦味的柚皮苷水解成鼠李糖和柚皮素-7-O葡萄糖苷，第二种是β-D-葡萄糖苷酶，它可使柚皮素-7-O葡萄糖苷水解成无味的柚皮素和葡萄糖。消除果汁中的苦味且改善其营养成分。经过该酶作用后的产物橙皮素或柚皮素等是生产高值甜味剂新橙皮苷二氢查尔酮的关键前体物质；另一方面，该酶不但可以用于脱苦橙汁，而且可以促进葡萄酒香气，消除橙汁中的橙皮苷、柚皮苷等晶体，提高柑橘类果汁的抗氧化活性。然而，目前天然游离的柚苷酶的稳定性不高，不能满足工业生产加工条件。

水解橙皮苷、柚皮苷等黄酮类化合物中的糖苷键主要有化学和生物两种方法，其中微生物酶技术克服了化学酸水解工艺的污染严重等缺陷，酶法脱苦具有专一性强、脱苦效果好、操作简单、脱苦条件温和、脱苦效果好，对果汁中其他营养成分及风味无破坏、酶法安全可靠等优点。因此，微生物酶法已成为目前国内外应用最广泛的果汁脱苦技术。

据文献报道，柚苷酶主要来源于天然真菌，如黑曲霉、青霉和米曲霉等，少量的柚苷酶来源于细菌和酵母菌，如木糖葡萄球菌、罗伦隐球酵母。其中不同来源的微生物产柚苷酶的酶学性质及酶的应用范围均存在差异。因此，筛选能够生产高活性及稳定柚苷酶的菌株具有重要的现实意义。

发明内容

为解决相关问题，本发明的首要目的在于提供一株粘质沙雷氏菌。

本发明的另一目的在于提供上述粘质沙雷氏菌在生产柚苷酶中的应用。

本发明的再一目的在于提供一种具有柚苷酶活性的生物制剂。

为了实现上述发明目的，本发明采用以下技术方案：

一株粘质沙雷氏菌，命名为粘质沙雷氏菌（Serratia marcescens）C10，其于2022年1月19日保藏于广东省广州市越秀区先烈中路100号大院59号楼的广东省微生物菌种保藏中心（GDMCC），保藏编号为GDMCC No: 62223。

所述的粘质沙雷氏菌C10在生产柚苷酶中的应用。

进一步地，所述的柚苷酶由α-L-鼠李糖苷酶和β-D-葡萄糖苷酶组成。

一种利用所述的粘质沙雷氏菌C10生产柚苷酶的方法，通过分离纯化粘质沙雷氏菌C10的细胞破碎液实现；具体包括如下步骤：

（1）将粘质沙雷氏菌C10接种于固体培养基培养，再接种于液体培养基培养，得到发酵液；

（2）离心分离发酵液，弃上清，重悬沉淀，进行超声破碎，得到细胞破碎液；

（3）分离纯化细胞破碎液，得到柚苷酶。

进一步地，步骤（1）中所述的接种于固体培养基培养的条件为28～32℃、150～200r/min培养1～3天；优选为30℃、180 r/min培养3天。