[发明专利]一种鉴别驯鹿源的特征多肽及其应用

权利要求书

1.一种鉴别驯鹿的特征多肽，其特征在于，所述特征多肽具体为：如SEQ ID No.1所示的肽段1：MLTSEEK。

2.一种用于鉴别驯鹿的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中包含权利要求1所述的特征多肽。

3.一种利用权利要求1所述的特征多肽鉴别驯鹿的方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）样品粉碎，称取样品50mg，加入10ml变性缓冲液，和1ml DTT溶液，摇匀，置80℃处理过夜，取出放冷至室温，离心，量取上清液500μL，加入100μL IAA溶液，避光反应30min，混匀，离心；对样品溶液脱盐后，量取上清液100μL，加入900μL，浓度为1%的碳酸氢铵溶液和10μL牛胰蛋白酶溶液，37℃酶解4h，取出放冷至室温，离心，取上清液，即得；

（2）将待检测溶液通过液相-三重四级杆质谱法进行检测，分析对比待检测溶液中的质谱结果同肽段1的质谱图，当质谱图中出现肽段1的质谱图时，可判断待测样品中含有驯鹿源成分。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述变性缓冲液具体制备过程为：称取573.1g 盐酸胍，121.1g 三羟甲基氨基甲烷，0.734g乙二胺四乙酸，加水溶解，加浓盐酸调pH至8.0，加水稀释至1L，摇匀，即得；所述DTT溶液的浓度为2.5M；所述IAA溶液的浓度为2M。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述牛胰蛋白酶溶液的具体制备过程为：称取牛胰蛋白酶适量，用乙酸溶液溶解，制成浓度为10mg/ml的溶液，临用现配；所述乙酸溶液的浓度为2%。

6.根据权利要求3-5任一项所述的方法，其特征在于，所述液相-三重四级杆质谱法中，液相条件为：色谱柱为2.1×50mm，1.7μm 的ACQUITY UPLC® BEH C18，柱温43℃，流速0.3mL/min，流动相A为0.1%甲酸溶液，B为0.1%甲酸乙腈溶液，进行梯度洗脱。

7.根据权利要求6所述的方法，所述梯度洗脱的条件为：0~9min,3%B→7.5%B；9~13min,7.5%B→25%B；13~14min,25%B→90%B；14~17min, 90%B；17~17.5min,90%B -97%B；17.5~21min,97%B，进样量为5 μl。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述液相-三重四级杆质谱法中，质谱条件：采用质谱检测器，电喷雾离子化ESI，正离子模式下，进行多反应监测；鞘气流速46L/hr；辅助气流速850 L/hr；喷雾电压3.5KV；离子源温度150℃；辅助气温度400℃；锥孔电压30V，碰撞电压35V；溶剂延迟为0～8min和14～20min；选择m/z（二电荷）419.20→258.1、419.20→217.1作为检测离子对。