[发明专利]成骨发育不全诱导多能干细胞及其构建方法

权利要求书

1.成骨发育不全诱导多能干细胞的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1：向体细胞中导入重编程因子，所述体细胞携带有成骨发育不全致病突变位点；

S2：重编程培养S1中获得的细胞，获得诱导多能干细胞。

2.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述成骨发育不全突变位点为COL1A1基因第10号外显子突变c.725GT。

3.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述成骨发育不全突变位点由以下方法筛选得到：

收集成骨发育不全患者样本，全基因组测序后与正常人比较，分析筛选得到候选基因突变位点的集合；

收集所述成骨发育不全患者家系内成员和正常人群的样本，验证所述集合内的候选基因突变位点，得到致病基因突变位点。

4.根据权利要求1或2所述的构建方法，其特征在于，所述体细胞为成骨发育不全患者的自体细胞。

5.根据权利要求1或2所述的构建方法，其特征在于，所述重编程因子包括OCT4、SOX2、NANOG、LIN28、c-MYC、KLF4和SV40LT。

6.根据权利要求1或2所述的构建方法，其特征在于，所述重编程培养所用的培养基为DMEM/F12培养基。

7.根据权利要求6所述的构建方法，其特征在于，所述DMEM/F12培养基中还添加有N-2添加剂、B-27添加剂、成纤维细胞生长因子、MEK抑制剂、GSK-3α/β抑制剂、TGF-β抑制剂、人白血病抑制因子、ROCK抑制剂。

8.诱导多能干细胞，其特征在于，采用权利要求1至7任一项所述的构建方法构建得到。

9.权利要求8所述的诱导多能干细胞在制备细胞模型、筛选药物中的应用。

10.与成骨发育不全相关的单核苷酸多态性分子标记，其特征在于，所述单核苷酸多态性分子标记为COL1A1基因第10号外显子突变c.725GT。