[发明专利]麦角硒因的制造方法

权利要求书

1.麦角硒因的制造方法，包括使组氨酸和硒化合物作用于转化株以得到麦角硒因的步骤，所述转化株是酱油曲霉作为宿主生物；

其中所述转化株被插入作为外源基因的编码下述(1)的酶的基因，并且将被插入的基因过量表达：

(1)在存在S-腺苷甲硫氨酸和铁(II)的条件下，催化从组氨酸和硒代半胱氨酸生成下述式〔I〕

[化1]

所示的海西宁硒半胱氨酸的反应的酶，编码所述(1)的酶的基因是具有与序列表中SEQID NO：1所示碱基序列大于等于85％且小于100％同一性的碱基序列的基因；或者所述(1)的酶是具有与序列表中SEQ ID NO：4所示氨基酸序列大于等于85％且小于100％同一性的氨基酸序列的酶。

2.根据权利要求1所述的制造方法，所述硒化合物是从有机硒化合物、无机硒化合物及它们的盐组成的组群中选出的至少一种硒化合物。

3.根据权利要求1所述的制造方法，所述硒化合物是从硒代半胱氨酸、硒代胱氨酸、硒蛋氨酸、Se-(甲基)硒基-L-半胱氨酸、硒肽、硒蛋白及它们的盐，以及硒酵母组成的组群中选出的至少一种硒化合物，和/或所述硒化合物是从硒酸、亚硒酸、氯化硒、硫化硒、二甲硒、硒代磷酸盐、二氧化硒及它们的盐组成的组群中选出的至少一种硒化合物。

4.根据权利要求1所述的制造方法，所述转化株被插入编码下述(2)的酶的基因，并且将被插入的基因过量表达，

(2)将5'-磷酸吡哆醛作为辅酶，催化从下述式〔I〕

[化2]

所示的海西宁硒半胱氨酸生成麦角硒因的反应的酶，编码所述(2)的酶的基因选自具有与序列表中SEQ ID NO：2所示碱基序列大于等于85％且小于100％同一性的碱基序列的基因以及具有与序列表中SEQ ID NO：3所示碱基序列大于等于85％且小于100％同一性的碱基序列的基因；或者所述(2)的酶选自具有与序列表中SEQ ID NO：5所示氨基酸序列大于等于85％且小于100％同一性的氨基酸序列的酶以及具有与序列表中SEQ ID NO：6所示氨基酸序列大于等于85％且小于100％同一性的氨基酸序列的酶。

5.根据权利要求1所述的制造方法，所述转化株是将表达由硒酸还原酶、硒代半胱氨酸裂解酶和丝氨酸脱水酶组成的组群中选出的至少一种酶的酱油曲霉作为宿主生物。

6.根据权利要求1所述的制造方法，所述转化株是与宿主生物相比编码所述(1)的酶的基因的表达被增强以增加麦角硒因的量的转化株。

7.根据权利要求1所述的制造方法，所述转化株是编码所述(1)的酶的基因的表达被增强的转化株，以使得利用适于宿主生物生长的含有硒胱氨酸的培养基，在30℃的条件下培养转化株5天期间的情况下，麦角硒因的量为每1克湿菌体质量10μg以上。

8.麦角硒因的制造方法，包括使组氨酸和硒化合物作用于转化株以得到麦角硒因的步骤，所述转化株是米曲霉作为宿主生物；

其中所述转化株被插入作为外源基因的编码下述(1)的酶的基因，并且将被插入的基因过量表达：

(1)在存在S-腺苷甲硫氨酸和铁(II)的条件下，催化从组氨酸和硒代半胱氨酸生成下述式〔I〕

[化1]

所示的海西宁硒半胱氨酸的反应的酶，编码所述(1)的酶的基因是具有与序列表SEQID NO：23所示碱基序列大于等于85％且小于100％同一性的碱基序列的基因；或者所述(1)的酶是具有与序列表SEQ ID NO：24所示氨基酸序列大于等于85％且小于100％同一性的氨基酸序列的酶。

9.根据权利要求8所述的制造方法，所述硒化合物是从有机硒化合物、无机硒化合物及它们的盐组成的组群中选出的至少一种硒化合物。