[发明专利]一种微生物制备5-氨基-1-戊醇的方法在审
申请号: | 202210315941.9 | 申请日: | 2022-03-29 |
公开(公告)号: | CN115109805A | 公开(公告)日: | 2022-09-27 |
发明(设计)人: | 李乃强;陈辰;毕吻吻;俞建勇 | 申请(专利权)人: | 东华大学 |
主分类号: | C12P13/00 | 分类号: | C12P13/00;C12N1/21;C12N9/88;C12N9/10;C12N9/02;C12R1/19;C12R1/15 |
代理公司: | 上海泰能知识产权代理事务所(普通合伙) 31233 | 代理人: | 黄志达 |
地址: | 201620 上*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 微生物 制备 氨基 戊醇 方法 | ||
1.一种微生物制备5-氨基-1-戊醇的方法,包括:将同时过表达含赖氨酸脱羧酶、腐胺氨基转移酶、醛脱氢酶编码基因的微生物,通过生物法制备得到5-氨基-1-戊醇。
2.根据权利要求1所述方法,其特征在于,所述微生物中还含过表达胺转运蛋白PotE编码基因。
3.根据权利要求1或2所述方法,其特征在于,所述基因来源于芽孢杆菌属、梭菌属、肠球菌属、棒状杆菌属、土芽孢杆菌属、乳杆菌属、乳球菌属、海洋芽孢杆菌属、葡萄球菌属、链球菌属、链霉菌属、弯曲杆菌属、肠杆菌属、沙雷氏菌属、埃希氏菌属、放线菌属、黄杆菌属、梭杆菌属、螺杆菌属、泥杆菌属、奈瑟氏菌属、假单胞菌属、沙门氏菌属、以及脲原体中的一种或几种。
4.根据权利要求3所述方法,其特征在于,所述基因来源于大肠杆菌。
5.根据权利要求1所述方法,其特征在于,所述微生物由下列方法制备:
(1)构建含权利要求1所述的编码基因表达的操纵子DNA;
(2)将所述操纵子DNA整合至表达载体并转化至宿主细胞进行独立复制和表达,或将所述操纵子DNA整合至宿主细胞染色体中稳定复制和表达,从而得到微生物。
6.根据权利要求5所述方法,其特征在于,所述步骤(1)中操纵子使用的启动子为诱导型启动子;其中诱导型启动子为乳糖/IPTG诱导型启动子、阿拉伯糖诱导型启动子、木糖诱导型启动子、鼠李糖诱导型启动子中的一种或几种。
7.根据权利要求5所述方法,其特征在于,所述步骤(2)中宿主细胞为大肠杆菌或谷氨酸棒杆菌。
8.根据权利要求1所述方法,其特征在于,所述生物法为发酵法;其中发酵培养工艺参数为:接种量5-15%,摇床转速150~220rpm,培养温度30~40℃,发酵时间48~72小时;所述发酵培养基为:葡萄糖5~15g/L,(NH4)2SO4 3~8g/L,KH2PO4 3~6g/L,MgSO4·7H2O 0.5~1.5g/L,苏氨酸0.1~0.5g/L,谷氨酸钠0.2~0.6g/L,vitamin B1 0.05~0.2g/L,抗生素为30~150μg/mL;
或培养基为葡萄糖5~15g/L,(NH4)2SO4 3~8g/L,KH2PO4 3~6g/L,MgSO4·7H2O 0.5~1.5g/L,苏氨酸0.1~0.5g/L,谷氨酸钠0.2~0.6g/L,vitamin B1 0.05~0.2g/L,抗生素为30~150μg/mL,5~10g/L赖氨酸盐酸盐或者5~10g/L赖氨酸盐酸盐。
9.根据权利要求8所述方法,其特征在于,所述抗生素为氯霉素,氨苄青霉素,四环素,卡那霉素,链霉素中的一种或几种。
10.一种权利要求1所述方法制备的5-氨基-1-戊醇。
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