[发明专利]一种鉴定罗氏沼虾中铁壳虾个体的引物及其应用有效
申请号: | 202210321680.1 | 申请日: | 2022-03-25 |
公开(公告)号: | CN114561479B | 公开(公告)日: | 2023-03-17 |
发明(设计)人: | 李喜莲;高强;慎佩晶;孟纪伦;蒋文枰;徐洋;程海华 | 申请(专利权)人: | 浙江省淡水水产研究所 |
主分类号: | C12Q1/6888 | 分类号: | C12Q1/6888;C12Q1/686;C12N15/11 |
代理公司: | 北京东方盛凡知识产权代理有限公司 11562 | 代理人: | 张换君 |
地址: | 313001 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 鉴定 罗氏沼虾中铁壳虾 个体 引物 及其 应用 | ||
1.一种鉴定罗氏沼虾中铁壳虾个体的引物,其特征在于,包括:
MRMSSR-7AF:CAACTGGTCACGCAAATCAA;
MRMSSR-7AR:GAGTTCAGCCTCATACCCCA。
2.一种试剂盒,其特征在于,包括权利要求1所述的引物。
3.一种检测罗氏沼虾中铁壳虾个体的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)提取待测罗氏沼虾的肌肉组织RNA;
(2)对所得RNA进行cDNA反转录;
(3)利用权利要求1所述的引物进行PCR扩增,获得扩增产物;
(4)对所得扩增产物进行毛细管电泳,根据电泳条带判断待测罗氏沼虾中是否为铁壳虾个体。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,在步骤(3)中,所述PCR扩增体系包括:DNA1μl,10μM的MRMSSR-7AF 1μl,10μM的MRMSSR-7AR 1μl,10*buffer 2μl,dNTP 0.5μl,Taq酶0.5μl,ddH2O 14μl。
5.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,在步骤(3)中,所述PCR扩增反应程序为:95℃5min,95℃30s、62-52℃30s、72℃30s共10个循环,95℃30s、52℃30s、72℃30s共25个循环,72℃7min。
6.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述电泳条带中存在双条带说明待测罗氏沼虾为铁壳虾个体。
7.一种权利要求1所述的鉴定罗氏沼虾中铁壳虾个体的引物或权利要求2所述的试剂盒在鉴定罗氏沼虾中铁壳虾个体方面的应用。
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