[发明专利]检测胰岛β细胞去分化的标志物的用途

说明书

本发明公开了一种检测胰岛β细胞去分化的标志物的用途，所述标志物为miR‑483‑5p，其miRNA成熟体序列如SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：2所示。miR‑483‑5p正/反向引物用于制备2型糖尿病β细胞去分化诊断试剂盒。本发明的miR‑483‑5p作为2型糖尿病早期β细胞去分化的标记物，可以敏感、准确的预警早期、低水平血糖的损害。

技术领域

本发明属于生物医药领域，特别涉及检测β细胞去分化的标志物的用途。

背景技术

糖尿病是以持续高血糖为特征的一种慢性代谢性疾病，主要是由于体内胰岛素分泌绝对或相对不足或胰岛素抵抗而导致的以糖代谢紊乱为主的一种综合病症。根据发病原因和机制的不同，糖尿病可分为：1型糖尿病、2型糖尿病、妊娠期糖尿病和其他特殊类型的糖尿病。目前，2型糖尿病占糖尿病总数的95％以上。而且，全球2型糖尿病的患病人数不断攀升，其主要危害是可引起心、脑、肾、视网膜病变等一系列严重并发症。虽然2型糖尿病的发病机制目前尚未完全阐明，但诸多研究数据显示，胰岛β细胞功能障碍是2型糖尿病发生发展的中心环节之一。

目前，糖尿病的诊断主要是通过糖耐量实验。糖尿病诊断标准为，空腹血糖≥7.0mmol/L或饭后2小时≥11.1mmol/L。当糖尿病症状者血糖到达这个数据时就可以确诊。糖尿病最典型的临床表现为“三多一少”，“三多”是指多饮、多食、多尿，“一少”是指体重减少，但是当出现三多一少时，糖尿病的病情已经不轻了。大多数早期患者没有症状，血糖数值也没有达到糖尿病的诊断标准。可能在发病多年之后才诊断出患有糖尿病，而此时则已出现并发症，对身体的各种组织特别是心脑血管系统、神经系统、眼睛、肾脏已造成长期损害。因此，找到一种明确而有效的生物标志物来作为2型糖尿病的早期预警信号，从而早诊断、早干预、早治疗，对控制糖尿病的发生和加重具有重要意义。

诸多临床研究都表明，当初诊断2型糖尿病时，胰岛细胞功能已经丧失过半。随着病程进展，β细胞凋亡，功能衰退仍会进行性发展，患者最终需要胰岛素替代治疗。众多2型糖尿病患者尸检结果显示，胰岛β细胞总数只有正常水平的50％，研究者最初将其归咎于β细胞的大量凋亡。后续研究显示，虽然胰腺中胰岛素的免疫荧光阳性率大幅下降，但被检测到的细胞凋亡与功能减退程度却不呈正比。由此提示，胰岛β细胞总数的大量减少原因可能发生了去分化。Cinti等通过研究2型糖尿病病人捐献的胰腺组织，证明了人体中也存在胰岛β细胞去分化的现象，并且去分化的β细胞比例(31.9％)远高于正常人(8.7％)。因此，去分化是造成β细胞功能丧失的一个重要原因。β细胞在受到代谢应激性损伤后的首先表型为去分化而非凋亡，这一“自私”行为保证了其能够继续存活而不至于立即死亡。去分化很可能是细胞在机体对其需求增大时的一种应对方式，如果机体出现肥胖和胰岛素抵抗、炎症因子损伤等持续性刺激，这些细胞就只能离其成熟状态渐行渐远，最终丧失分泌功能而真正“凋亡”。

microRNA(miRNA)是一类高度保守的非编码小RNA，长度约为18-25个核苷酸。miRNA广泛存在于原核和真核生物体内，对细胞的增殖、分化、凋亡、胚胎的发育、器官的形成、内分泌的调控、疾病的发生、发展都起着重要的调节作用。miRNA通过靶向一个或多个基因的3’非编码区域，降解其mRNA或抑制其翻译的进行，从而达到对基因表达的调控作用。miRNA与肿瘤、心脑血管疾病、内分泌疾病等诸多疾病的发生密切相关。

发明内容

发明目的：本发明公开了用于检测胰岛β细胞去分化的miRNA分子标志物miR-483-5p的用途，其正/反向引物用于制备2型糖尿病β细胞去分化诊断试剂盒。

技术方案：检测胰岛β细胞去分化的标志物的用途，所述标志物为miR-483-5p，其miRNA成熟体序列如SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：2所示；

SEQ ID NO：1：5’-AAGACGGGAGGAAAGAAGGGAG-3’；

SEQ ID NO：2：5’-AAGACGGGAGAAGAGAAGGGAG-3’。