[发明专利]不同基原山银花的鉴别方法在审
申请号: | 202210333002.7 | 申请日: | 2022-03-31 |
公开(公告)号: | CN114689753A | 公开(公告)日: | 2022-07-01 |
发明(设计)人: | 朱德全;丁青;刘晓霞;李振雨;孙冬梅;陈向东;陶晨璐 | 申请(专利权)人: | 广东一方制药有限公司;浙江一方制药有限公司 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02;G01N30/06;G01N30/86 |
代理公司: | 华进联合专利商标代理有限公司 44224 | 代理人: | 苏婕 |
地址: | 528244 广东省*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 不同 基原山银花 鉴别方法 | ||
1.一种不同基原山银花的鉴别方法,其特征在于,包括如下步骤:
取新绿原酸、绿原酸、3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸、4,5-O-二咖啡酰奎宁酸、灰毡毛忍冬皂苷乙、川续断皂苷乙、隐绿原酸、异绿原酸B、断氧化马钱子苷与灰毡毛忍冬皂苷甲对照品,制备混合对照品溶液;
取不同基原山银花的样品,分别制备不同基原山银花的供试品溶液;
将混合对照品溶液与不同基原山银花的供试品溶液分别进行超高效液相色谱分析,分别构建所述不同基原山银花的特征图谱;
取待测物,进行超高效液相色谱分析,将获得的所述待测物的图谱与所述不同基原山银花的特征图谱进行比较。
2.根据权利要求1所述的不同基原山银花的鉴别方法,其特征在于,超高效液相色谱分析的条件包括:流动相A为乙腈,流动相B为磷酸水溶液;采用梯度洗脱方式;所述梯度洗脱方式为:0min~1min,流动相A的体积百分数由7%变化至10%;1min~9min,流动相A的体积百分数由10%变化至21%;9min~24min,流动相A的体积百分数由21%变化至42%。
3.根据权利要求2所述的不同基原山银花的鉴别方法,其特征在于,所述磷酸水溶液中,磷酸的体积分数为0.03%~0.07%。
4.根据权利要求1所述的不同基原山银花的鉴别方法,其特征在于,超高效液相色谱分析的条件包括:色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶柱;柱温为28℃~32℃;流速为0.28mL/min~0.32mL/min;波长为210nm。
5.根据权利要求1所述的不同基原山银花的鉴别方法,其特征在于,制备混合对照品溶液包括如下步骤:
将新绿原酸、绿原酸、3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸、4,5-O-二咖啡酰奎宁酸、灰毡毛忍冬皂苷乙、川续断皂苷乙、隐绿原酸、异绿原酸B、断氧化马钱子苷、灰毡毛忍冬皂苷甲对照品与甲醇混合。
6.根据权利要求5所述的不同基原山银花的鉴别方法,其特征在于,所述混合对照品溶液的质量浓度为50μg/mL~80μg/mL。
7.根据权利要求1所述的不同基原山银花的鉴别方法,其特征在于,分别制备不同基原山银花的供试品溶液包括如下步骤:
分别粉碎不同基原山银花样品,过筛,与质量浓度为50%~70%的甲醇混合,进行超声提取或加热回流提取,过滤,取滤液。
8.根据权利要求7所述的不同基原山银花的鉴别方法,其特征在于,超声提取的条件包括:温度为25℃~50℃;时间为25min~35min。
9.根据权利要求7所述的不同基原山银花的鉴别方法,其特征在于,加热回流提取的条件包括:温度为80℃~100℃;时间为25min~35min。
10.根据权利要求1~9任一项所述的不同基原山银花的鉴别方法,其特征在于,不同基原山银花包括灰毡毛忍冬、黄褐毛忍冬与红腺忍冬中的两种或多种。
11.根据权利要求10所述的不同基原山银花的鉴别方法,其特征在于,所述灰毡毛忍冬的特征图谱中,特征峰的数量为11;
所述黄褐毛忍冬的特征图谱中的特征峰的数量为9;
所述红腺忍冬的特征图谱中的特征峰的数量为6。
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