[发明专利]一种芹菜耐热基因AgDREBA6c及其应用

说明书

本发明公开了一种芹菜耐热基因AgDREBA6c及其应用，属于基因工程领域。本发明公开了基因AgDREBA6c在植物高温胁迫中发挥重要调控作用。本发明从芹菜品种‘津南实芹’中克隆了一个新的DREB基因AgDREBA6c，阐述了其在植物耐热性方面的功能。通过根瘤农杆菌介导的方法将本发明所述基因转入拟南芥，获得的转基因植株的耐热能力明显提高，证实本发明的基因具有广泛的应用前景。

技术领域

本发明涉及基因工程领域，特别是涉及一种芹菜耐热基因AgDREBA6c及其应用。

背景技术

芹菜(ApiumgraveolensL)为伞形科一年或多年生草本植物，原产于地中海沿岸的沼泽地带，世界各国已普遍栽培，是一种重要的蔬菜作物。‘津南实芹’是天津津南区选育的优良地方品种，抗逆性强，生长速度快，南北四季均可栽培。

农作物的生长、发育及产量受到许多生物和非生物胁迫的影响，如干旱、低温或高温等极端天气、土壤盐渍化等。在植物中，许多基因在胁迫下被诱导表达，这些基因不仅自身能产生有抵抗力的功能性蛋白，同时也作为信号传导因子参与胁迫应答。

一些研究已经表明转录因子在基因表达调控中起重要作用，其中AP2/ERF家族转录因子是一类广泛参与各种生物过程的转录因子。以往研究证明DREB类转录因子能够特异性地结合DRE(Dehyaration responsive element)顺式元件，DRE元件也在许多非生物胁迫相关的基因的启动子中被发现。

DREB转录因子是一类植物中特有的、可以调控多个与干旱、高盐及低温等非生物胁迫有关功能基因表达的转录因子。为了解决如何提高植株对高温胁迫的抗逆性的问题，本发明从芹菜品种‘津南实芹’中克隆了一个新的DREB基因AgDREBA6c，阐述了其在植物耐热性方面的功能。扩大了AP2/ERF家族转录因子的应用前景。

发明内容

本发明的目的是提供一种芹菜耐热基因AgDREBA6c及其应用，以解决如何提高植株对高温胁迫的抗逆性的问题。

为实现上述目的，本发明提供了如下方案：

技术方案一：一种耐热基因AgDREBA6c，其核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。

技术方案二：利用耐热基因AgDREBA6c培育转基因植物的方法，包括克隆耐热基因AgDREBA6c，并将所述耐热基因AgDREBA6c转入受体植物中培育得到转基因植物。

进一步地，所述克隆耐热基因AgDREBA6c包括以下步骤：

(1)设计引物，正向引物：5’-ATGTACCCATCCAGCTCCT-3’，反向引物：5’-CTATATAGATGCCCAATCGATTT-3’；

(2)通过PCR方法克隆AgDREBA6c基因，所述PCR方法的反应条件为：94℃预变性5min；94℃变性30s，54℃退火30s，72℃延伸60s，共30个循环；72℃延伸10min。

技术方案三：耐热基因AgDREBA6c在增加植物根系生长活力中的应用。

技术方案四：耐热基因AgDREBA6c在提高植物对高温胁迫的抗逆性中的应用。

技术方案五：耐热基因AgDREBA6c在培育和改良抗高温性植物中的用途。

本发明公开了以下技术效果：

本发明提供了一种芹菜耐热基因AgDREBA6c及其应用，其中耐热基因AgDREBA6c是利用PCR扩增技术从芹菜‘津南实芹’中克隆的一种新的DREB转录因子，该DREB转录因子能够增强植物对高温的耐性。获得的AgDREBA6c基因有利于深入了解芹菜高温环境下的响应机制，同时也能用于培育抗高温性的植物。

附图说明