[发明专利]小分子抑制剂ML385在抑制肿瘤细胞PD-L1方面的应用

权利要求书

1.一种小分子抑制剂ML385在抑制肿瘤细胞PD-L1方面的应用。

2.根据权利要求1的应用，其特征在于，所述ML385抑制剂抑制肿瘤细胞中PD-L1的功能，激活T细胞的抗肿瘤免疫功能。

3.一种小分子抑制剂ML385在抑制肿瘤细胞PD-L1和PD-L2方面的应用。

4.根据权利要求3的应用，其特征在于，所述ML385抑制剂通过抑制NRF2和MAF的结合，破坏NRF2识别PD-L1L2-SE的核心位点，从而抑制PD-L1和PD-L2的表达。

5.小分子抑制剂ML385在抑制LPS诱导的PD-L1和PD-L2表达方面的应用。

6.一种杀伤肿瘤细胞的药物，其特征在于，包括小分子抑制剂ML385。

7.根据权利要求6的杀伤肿瘤细胞的药物，其特征在于，所述药物还包括抗PD-L1抗体或抗PD-L2抗体。

8.小分子抑制剂ML385抑制在制备治疗乳腺癌药物方面的应用，其特征在于，所述药物包括小分子抑制剂ML385，所述小分子抑制剂ML385抑制超增强子及LPS诱导的PD-L1。

9.小分子抑制剂ML385抑制PDL1的检测方法，其特征在于，包括以下过程：

（1）对PD-L1L2-SE进行了精细分析，发现一段核心区域（hg19: Chr9: 5498950-5499663）；设计了所有sgRNA，共22个sgRNA；通过分别建立稳定sgRNA细胞系，sgRNA-22号对PD-L1的表达影响最大；用定量RT-PCR进一步检测，发现sgRNA-22稳定细胞系能显著下调PD-L1和PD-L2的表达；

（2）对sgRNA-22的细胞系进行了DNA测序，测序发现在sg-RNA-22位置有TGT的缺失；缺失TGT碱基后，该序列将无法被NRF2/MAF复合物识别；

（3）小分子抑制剂ML385处理SUM159和MDA-MB-231后，PD-L1的蛋白水平显著下降；进一步用定量RT-PCR进行测试，小分子抑制剂ML385处理细胞后，PD-L1和PD-L2的mRNA水平显著下降，表明小分子抑制剂ML385抑制超增强子PD-L1L2-SE的功能，进而抑制PD-L1和PD-L2的表达；

（4）诱导NRF2/MAF活化的条件，进一步激活PD-L1L2-SE超增强子，增强PD-L1的表达；LPS刺激激活NRF2的表达和PD-L1的表达；ML385处理抑制LPS诱导的PD-L1高表达；验证通过ML385处理可以显著下调超增强子PD-L1L2-SE诱导的PD-L1高表达和免疫逃逸；ML385处理抑制LPS诱导的PD-L1高表达；NRF2的抑制剂ML385可以通过抑制超增强子及LPS诱导的PD-L1。