[发明专利]一种新型冠状病毒mRNA疫苗及其制备方法和用途

权利要求书

1.一种mRNA疫苗，其特征在于，所述mRNA疫苗包含：

至少一个信使核糖核酸mRNA，所述mRNA编码至少一种抗原肽或结构蛋白，所述抗原肽或结构蛋白包括SARS-CoV-2冠状病毒的刺突蛋白的衍生蛋白，所述刺突蛋白的衍生蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6或者SEQ ID NO:7所示，所述mRNA疫苗还包含脂质纳米颗粒，所述mRNA包封于所述脂质纳米颗粒中，所述脂质纳米颗粒包含阳离子脂质、中性磷脂、甾族脂质和聚乙二醇-脂质，所述阳离子脂质的结构为：ALC-0315：

。

2.根据权利要求1所述的mRNA疫苗，其特征在于，所述刺突蛋白的衍生蛋白还包括将SEQ ID NO:4-7的第1-13位替换为其他强信号肽，或在N端增加其他强信号肽；

所述其他强信号肽包括组织型纤溶酶原激活剂的信号肽和血清免疫球蛋白E的信号肽。

3.根据权利要求1所述的mRNA疫苗，其特征在于，所述刺突蛋白的衍生蛋白还包括在N端或C端增加用于形成多聚体的片段，所述片段包括Fc片段或噬菌体T4纤维蛋白的三聚化基序。

4.根据权利要求1所述的mRNA疫苗，其特征在于，所述mRNA序列是天然或修饰的RNA，所述修饰的RNA包括通过用修饰的尿苷部分或全部取代天然尿苷对RNA进行修饰。

5.根据权利要求4所述的mRNA疫苗，其特征在于，所述mRNA序列是修饰的RNA，所述修饰的RNA为通过用1-甲基-假尿苷对天然尿苷进行全部替换。

6.根据权利要求1所述的mRNA疫苗，其特征在于，所述聚乙二醇-脂质选自：2-[(聚乙二醇)-2000]-N,N-二十四烷基乙酰胺、1,2-二肉豆蔻酰基-sn-甘油甲氧基聚乙二醇、1,2-二硬脂酰基-sn-甘油基-3-磷酸乙醇胺-N-[氨基(聚乙二醇)]、PEG-二甾醇基甘油、PEG-二棕榈油基、PEG-二油基、PEG-二硬脂基、PEG-二酰基甘油酰胺、PEG-二棕榈酰基磷脂酰乙醇胺、PEG-1,2-二肉豆蔻酰基氧基丙基-3-胺或DMG-PEG2000中的一种或多种组合。

7.根据权利要求1所述的mRNA疫苗，其特征在于，所述的中性磷脂选自：1,2-二硬脂酰-sn-甘油-3-磷酸胆碱、1,2-二棕榈酰-sn-甘油-3-磷酸胆碱、1,2-二油酰-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺、1,2-二棕榈酰-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺、1,2-二肉豆蔻酰-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺、2-二油酰基-sn-甘油-3-磷酸-(1'-rac-甘油)、油酰磷脂酰胆碱、1-棕榈酰基-2-油酰基磷脂酰乙醇胺中的一种或多种组合。

8.根据权利要求1所述的mRNA疫苗，其特征在于，所述的甾族脂质选自燕麦甾醇、β-谷甾醇、菜子甾醇、麦角骨化醇、菜油甾醇、胆甾烷醇、胆固醇、粪甾醇、脱氢胆固醇、链甾醇、二氢麦角骨化醇、二氢胆固醇、二氢麦角甾醇、黑海甾醇、表胆甾醇、麦角甾醇、岩藻甾醇、六氢光甾醇、羟基胆固醇以及经多肽修饰后的胆固醇；羊毛甾醇、光甾醇、海藻甾醇、谷甾烷醇、谷甾醇、豆甾烷醇、豆甾醇、胆酸、甘氨胆酸、牛磺胆酸、脱氧胆酸和石胆酸中的一种或多种组合。

9.根据权利要求1所述的mRNA疫苗，其特征在于，所述聚乙二醇-脂质为DMG-PEG2000；所述中性磷脂为DSPC；所述的甾族脂质为胆固醇。

10.根据权利要求1所述的mRNA疫苗，其特征在于，所述的阳离子脂质在脂质组分中的摩尔百分含量为20~60%、中性磷脂在脂质组分中的摩尔百分含量为5%~25%、甾族脂质在脂质组分中的摩尔百分含量为25%~55%；聚乙二醇-脂质在脂质组分中的摩尔百分含量为0.1%~15%。

11.根据权利要求1所述的mRNA疫苗，其特征在于，脂质纳米颗粒中总脂质与mRNA的质量比在10-30：1之间。