[发明专利]NCOR2可变剪切体在制备预防或治疗马尔尼菲篮状菌感染的药物中的应用

说明书

本发明涉及生物技术领域，尤其涉及一种NCOR2可变剪切体在制备预防或治疗马尔尼菲篮状菌感染的药物中的应用；马尔尼菲篮状菌(TM)感染诱导THP‑1巨噬细胞NCOR2产生可变剪切体NCOR2‑013，所述NCOR2‑013剪切体由四个外显子构成，分别为ENSE00001612626、ENSE0000997027、ENSE0000997044、ENSE00001703068，其序列依次如SEQIDNo.1、SEQIDNo.2、SEQIDNo.3、SEQIDNo.4所示；其中蛋白序列如SEQIDNo.5所示。本发明为TM诊断治疗提供潜在的生物标志物；而且获得了NCOR2‑013的新特性，即通过与TBL1XR1‑TBLR1‑HDAC3‑JunB形成复合体，通过抑制TNF‑α和IL‑1β的转录，发挥抗炎作用，促进TM的增殖和感染；基于NCOR2‑013在TM感染中发挥的作用，为研发防治TM感染的药物或疫苗提供新靶标。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种NCOR2可变剪切体在制备预防或治疗马尔 尼菲篮状菌感染的药物中的应用。

背景技术

马尔尼菲篮状菌(Talaromycesmarneffei，TM)感染是我国华南地区AIDS人群死亡的 重要原因之一。TM感染是一种区域高发性疾病，主要流行于中国南部和东盟各国的AIDS人群。广西艾滋病患者合并TM感染的死亡风险居所有机会性感染之首(AHR＝4.51)，而 我国56.6％的TM病报告病例出现在广西。因此，TM感染是造成中国南部和东南亚沿线 国家艾滋病病人死亡的重要原因，已经成为当地一个严重的公共卫生问题，TM也被WHO 拟列入“重点真菌病原体清单”。

TM病高致死率的原因一方面在于早期诊断困难，而另一方面是由于临床抗真菌治疗 的效果并不理想。TM病病人若不进行治疗，病死率高达80％-100％，而及时进行抗真菌治疗，病死率亦可高达30％。因此，优化治疗方案以降低病死率是当前亟待解决的临床问题。有趣的是，既往研究发现斑马鱼胚胎的巨噬细胞能够保护TM免受中性粒细胞的杀伤。由此可见，TM在人体内可能存在一套基于巨噬细胞的免疫逃逸策略。TM作为一种嗜巨 噬细胞性真菌，在入侵机体后绝大多数被巨噬细胞吞噬。巨噬细胞作为机体抵抗病原体入 侵的第一道防线，反而为TM提供躲避免疫杀伤的生态位，这类现象被《Immuntiy》杂志 称为“巨噬细胞悖论”。实际上，不少病原体，如肺结核分支杆菌、白色念珠菌等，均存 在该现象。因此，弄清TM逃逸巨噬细胞杀伤的分子机制，找出针对性的治疗靶点和干预 措施，破解“巨噬细胞悖论”是当前的科学前沿问题，对治疗TM病病人、降低病死率具 有重要意义。

可变剪切(Alternativesplicing，AS)是一种普遍存在的基因表达调控机制，它允许单 个基因产生多种独特的mRNA。既往研究发现大约90％-95％的基因都会经历一定程度的 AS，而大约37％的基因能产生多种异型蛋白，而这些蛋白可能发挥着截然不同的生物学功 能，这说明AS在蛋白质组的复杂性和功能多样性中发挥了重大作用。因此，探索AS的 功能对于理解生命机制是至关重要的，然而目前仅多见于肿瘤研究中，真菌领域特别是TM 感染方面鲜有研究。

NCOR2作为一种关键的Bcl6共抑制因子，主要在NF-κB调节的炎症和组织重塑上发挥作用。NCOR2发生AS事件可导致24种不同的转录本变异体及其编码可变剪切体， 其中功能较为明确的剪切体为分子量为274Kda的NCOR2或SMRT蛋白(下称为SMRT)。 SMRT可通过招募TBL1、TBLR1和HDAC3形成核共抑制复合物，抑制转录因子(AP-1 等)的激活，从而抑制机体炎症因子的转录水平，起到抗炎作用。当机体受到外界刺激， 如损伤、病原体入侵等，SMRT-TBL1-TBLR1-HDAC3复合体会被泛素化降解，从而解除 其对于炎症因子的转录抑制，机体产生大量炎症因子用于免疫反应。NCOR2-013是NCOR2 一个可变剪切体，分子量小，由156个氨基酸构成，仅为SMRT蛋白的十六分之一。