[发明专利]一种用于玄参药材中哈巴俄苷的含量测定方法

权利要求书

1.一种用于玄参药材中哈巴俄苷的含量测定方法，其特征在于：包括如下步骤：

供试品溶液制备步骤：

取0.5g玄参药材，研磨粉碎，取出粉碎后的玄参药材放置于烧杯内；

将50mL甲醇水溶液倒入至烧杯内浸泡玄参药材1h；

对浸泡1h后的溶液进行超声提取30min，提取液过滤即得到供试品溶液；

对照品溶液配制步骤：

取哈巴俄苷对照品适量，精密称定；

加甲醇水溶液稀释制成系列质量浓度的溶液，得到对照品溶液；

含量测定步骤：

精密吸取对照品溶液10μL，注入液相色谱仪，测定；

记录质谱图，测定离子峰强度，计算比值，绘制标准曲线；

在同样的条件下，对供试品溶液进行检测，根据上述标准曲线，得到玄参药材中哈巴俄苷的含量。

2.根据权利要求1所述的一种用于玄参药材中哈巴俄苷的含量测定方法，其特征在于：液相色谱仪采用超高效液相色谱仪联用单四级杆质谱检测器。

3.根据权利要求2所述的一种用于玄参药材中哈巴俄苷的含量测定方法，其特征在于：色谱柱为BEHC18色谱柱，2.1×50mm,1.7μm，流动相A为乙腈，流动相B为0.1％甲酸水，梯度洗脱程序为0～1.39min，3％A；1.39～1.67min，3％～15％A；1.67～4.86min，15％～35％A；4.86～6.25min，35％～60％A；6.25～7.64min，60％～80％A；7.64～9.03min，80％A；9.03～9.33min，80％～3％A；9.33～10.00min，3％A；检测波长为278nm；流速为0.3mL/min，进样量为10μL。

4.根据权利要求3所述的一种用于玄参药材中哈巴俄苷的含量测定方法，其特征在于：质谱条件：使用电喷雾电离源(ESI)，正离子模式；

毛细管电压为1.5kV；探针温度为600℃；

采样速率为10点/秒；

采用多离子监测扫描模式。

5.根据权利要求4所述的一种用于玄参药材中哈巴俄苷的含量测定方法，其特征在于：在供试品溶液制备步骤中甲醇水溶液为体积浓度50％的甲醇水溶液。

6.根据权利要求5所述的一种用于玄参药材中哈巴俄苷的含量测定方法，其特征在于：在对照品溶液配制步骤中所述甲醇水溶液为体积浓度50％的甲醇水溶液；

在对照品溶液配制步骤中所述哈巴俄苷系列质量浓度的溶液依次为50、39、30、21、9、6、3μg·mL^-1。

7.根据权利要求6所述的一种用于玄参药材中哈巴俄苷的含量测定方法，其特征在于：超高效液相色谱仪为二元溶剂管理器Binary Solvent Manager(BSM)，样品管理器SampleManager(FTN)，二极管阵列检测器eλDetector(PDA)，柱温箱Column Heater(CH-A)；

所用单四级杆质谱检测器为Waters QDA配有电喷雾电离源(ESI)；

单四级杆质谱检测器QDA与二极管阵列检测器PDA是通过非最小死体积管线进行连接的；

所述非最小死体积管线为管线内径和总长度共同作用下可以延长哈巴俄苷离子化时间大于0.2min；

所述非最小死体积管线为选自peek材质管线、不锈钢材质管线、PTFE橡胶材质管线的一种或者几种；

所述非最小死体积管线为管线中间任意位置可以连接有阻尼装置；

优选的非最小死体积管线为peek材质的Regulator,Back Pressure,250PSI(#700010006)(waters)背压管线。

8.根据权利要求7所述的一种用于玄参药材中哈巴俄苷的含量测定方法，其特征在于：液相色谱-质谱条件中采用多离子监测扫描模式(Full Scan)，质量扫描范围为500-800道尔顿，扫描时间4-7min；

所述配制流动相用水为屈臣氏商品蒸馏饮用水。