[发明专利]一种可拮抗hnRNPK蛋白RNA结合活性的多肽HIP-15及其应用

说明书

本发明公开了一种可拮抗hnRNPK蛋白RNA结合活性的多肽HIP‑15及其应用，属于分子生物技术领域，该多肽HIP‑15包括白血病肿瘤细胞杀伤结构域和穿膜结构域，其中，白血病肿瘤细胞杀伤结构域的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示，穿膜结构域的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。本发明的抗白血病肿瘤多肽的穿膜结构域本身没有细胞毒性，但连接白血病细胞杀伤结构域后，有明显的抑制白血病细胞增殖、克隆形成的效应。本发明的抗白血病肿瘤多肽，不仅可以单独作为抗白血病肿瘤的生物治疗药物，还有望结合其他治疗方式来抑制白血病。

技术领域

本发明涉及分子生物技术领域，特别是涉及一种可拮抗hnRNPK蛋白RNA结合活性的多肽HIP-15及其应用。

背景技术

白血病是骨髓中的一种癌症，会导致产生的白细胞数量异常增加。它是一类造血干细胞恶性克隆性疾病，克隆性白血病细胞因为增殖失控、分化障碍、凋亡受阻等机制在骨髓和其他造血组织中大量增殖累积，并浸润其他非造血组织和器官，同时抑制正常造血功能。白血病严重影响着人类的健康，目前已有的抗白血病方法虽有一定疗效，但仍存在疗效低、选择性差、毒副反应大、易产生耐药等问题。因此，寻找新型高效低毒的抗白血病药物一直是国内外医药研发的热点。

白血病靶向治疗是指在分子水平上，通过药物靶向作用于白血病细胞，使其特异性死亡，而不影响正常组织细胞。与传统细胞毒化疗不一样，白血病分子靶向治疗具有特异性抗肿瘤作用，且毒性明显减少。靶向治疗的发展使得人类对癌症的治疗更加精准。近十年来，抗肿瘤靶向药物的研发已经占到肿瘤药物研发中的80％，包括小分子抑制剂、单克隆抗体等。

靶向多肽由于易于合成、免疫原性低、活性高、不良反应轻和来源广泛等优点，已应用于抗肿瘤药物研究。抗瘤性多肽通过与特定位点的结合，发挥抑制肿瘤发生、发展的作用。因此，越来越多的多肽药物被开发并应用于临床。迄今在生物体内发现的多肽已达数万种，广泛参与调节机体内各系统、器官、组织和细胞的功能活动，在生命活动中发挥重要作用。近年来，利用现代生物技术合成的多肽药物已成为药物研发的热点之一。

但是针对白血病的靶向多肽面临靶点寻找困难等问题，所以有必要积极研究针对白血病的靶向多肽的靶点，并给予相应的靶向多肽干预。

hnRNPK(全称为Heterogeneous nuclear ribonucleoprotein K)是一个多功能的RNA结合蛋白，主要定位于细胞核，且可以在细胞核与细胞质间穿梭。hnRNPK是poly(C)-binding protein(PCBP)家族的成员。hnRNPK是前体信使RNA(pre-mRNA)代谢所必需的，hnRNPK可以作为支架，组织核酸和其他蛋白伙伴之间的相互作用，在不同阶段调控基因表达。hnRNPK可通过调控不同的肿瘤靶细胞，从而导致细胞周期的异常调节，并在细胞增殖、DNA修复和癌症进展中发挥多种功能。研究发现其在白血病中高表达，促进白血病发展。已知hnRNPK与多种肿瘤之间有着密切的联系，比如乳腺癌、急性白血病、肺癌、神经母细胞瘤等，hnRNPK在这些肿瘤的发生、发展中均起到促进作用。目前，hnRNPK特异性抑制剂尚未见报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种可拮抗hnRNPK蛋白RNA结合活性的多肽HIP-15及其应用，以解决上述现有技术存在的问题，本发明通过设计靶向多肽，针对hnRNPK的作用位点，从而阻断hnRNPK的促癌效应，最终抑制白血病肿瘤的发生发展；并且将该多肽与细胞穿膜肽通过共价键连接起来，达到既有靶向白血病肿瘤细胞，又具有高效入胞的效果。

为实现上述目的，本发明提供了如下方案：

本发明提供一种可拮抗hnRNPK蛋白RNA结合活性的多肽，所述多肽的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。实验证明，该多肽可竞争性拮抗促癌基因hnRNPK与RNA的结合，并在细胞水平表现出明显的肿瘤抑制作用。

本发明还提供一种多肽在拮抗hnRNPK蛋白RNA结合活性中的应用，所述多肽的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。