[发明专利]基于HPLC法的活血止痛胶囊中土鳖虫的鉴别方法

说明书

本发明公开了基于高效液相色谱(HPLC)法的活血止痛胶囊中土鳖虫的鉴别方法，包括以下测定条件及步骤：S1对照溶液的制备，S2供试品溶液的制备，S3色谱分析条件，S4特征峰图谱确定，S5鉴别，将特征峰图谱与三批活血止痛胶囊内容物检测的特征图谱进行比对，根据特征峰的有无即可判定活血止痛胶囊的质量。本发明利用高效液相色谱分析技术，采用特征峰图谱对照方式，可以快速高效地检测出活血止痛胶囊质量以及掺伪情况；本发明中的土鳖虫的特征峰检测方式方便快捷，供试品制备简单，准确性高，在液相色谱仪的帮助下可以有效快速地监控活血止痛胶囊中土鳖虫药材的质量，从而保障产品的质量稳定、可控，杜绝假冒伪劣药材的混入。

技术领域

本发明涉及药物成分分析技术领域，具体为基于HPLC法的活血止痛胶囊中土鳖虫的鉴别方法。

背景技术

活血止痛胶囊是活血止痛散改剂型的原国家四类新药，由当归、土鳖虫、自然铜(煅)、三七、乳香(醋)、冰片6味药组成。其中土鳖虫，又名地鳖虫、土元等，在我国有悠久的药用历史。土鳖虫含多种氨基酸，挥发油，脂肪醛和芳香醛，生物碱，β-谷甾醇，鲨肝醇，尿嘧啶和尿囊素，尚含多种微量元素。方中土鳖虫为臣药，现有质量标准采用显微鉴定的方法鉴定其刚毛。该方法的鉴定标识在生物学上为物种的遗传表现型，不仅受到遗传因素的影响，而且与生物体的生长发育阶段、环境条件等有着密切的关系，具有很大的变异性和可塑性，且受鉴定者主观判断影响较大，在复方药味复杂、药材显微形态多被破坏的情况下，显微鉴定多受限制。因此，需要探索一种更加科学、更加直观的鉴定方法，为此，我们提出基于HPLC法的活血止痛胶囊中土鳖虫的鉴别方法。

发明内容

本发明要解决的技术问题是克服现有的缺陷，提供基于HPLC法的活血止痛胶囊中土鳖虫的鉴别方法，可以通过HPLC法确定土鳖虫的特征峰，再利用特征峰比对的方法来鉴别活血止痛胶囊中是否含有土鳖虫或者含有土鳖虫的真伪，可以有效解决背景技术中的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：基于HPLC法的活血止痛胶囊中土鳖虫的鉴别方法，包括以下测定条件及步骤：

S1对照溶液的制备

精密称取土鳖虫对照药材粉末适量，用70％甲醇超声提取，制成对照溶液；

S2供试品溶液的制备

精密称取当归粉末、三七粉末、醋乳香粉末、冰片、煅自然铜、不同产地、不同类型、不同批次的土鳖虫药材粉末、金边地鳖、两批龙虱和三批活血止痛胶囊内容物，分别使用70％甲醇超声提取，制成各供试品溶液；

S3色谱分析条件

色谱柱：ZORBAX Eclipse XDB-C18色谱柱(规格：250×4.6mm)(SN：USNH085399，LN：B20441)，流动相A：乙腈，流动相B：0.1％磷酸水，检测波长：203nm，柱温30℃，流速：1.0ml/min，进样量：10ul，梯度分析方法：0-10min:20％A；10-100min:20％～90％A；100-110min；90％A；110-115min:90％A～20％；115-130min 20％A；

S4特征峰图谱确定

(1)精密吸取对照溶液10μL注入液相色谱仪，测定，记录色谱图，即得对照液相色谱图；

(2)精密吸取不同产地、不同类型、不同批次的土鳖虫供试品溶液各10μL，分别注入液相色谱仪进行测定，记录色谱图，得到多个土鳖虫液相色谱图；

(3)对土鳖虫对照药材、不同产地、不同类型、不同批次的土鳖虫进行色谱检测，确定土鳖虫对照药材和不同产地、不同类型、不同批次的土鳖虫的共有化合物，即为土鳖虫的色谱图中特征峰图谱，作为鉴别土鳖虫标准中的特征峰；

S5鉴别