[发明专利]一种抗性基因SpCIPK25、蛋白、表达载体和应用

说明书

本发明属于植物基因工程技术领域，具体涉及一种抗性基因SpCIPK25、蛋白、表达载体和应用。本发明提供的抗性基因SpCIPK25的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示，所述抗性基因SpCIPK25具有提高植物抗旱性耐盐性的作用。

技术领域

本发明属于植物基因工程技术领域，具体涉及一种抗性基因SpCIPK25、蛋白、表达载体和应用。

背景技术

紫花针茅(Stipapurpurea Griseb.)是禾本科(Gramineae)针茅属(Stipa L.)的多年生旱生草本植物。是青藏高原、帕米尔高原和中亚高山地区的特有植物，具有耐寒、耐旱、耐践踏和抗风沙等特性，在我国主要分布在海拔1900～5150m的西藏、青海、甘肃、新疆和四川等地，是高寒草原特有的优势种、建群种，对高原环境的干旱、低温、强紫外线及贫瘠土壤等胁迫条件具有极强的适应性，在高寒草地中分布面积极广。

CIPKs(CBL-interactingproteinkinase)是在CBL-CIPK复合体中具有信号转导功能的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶，参与植物在胁迫响应中的第二信使之一的Ca²⁺信号转导，为植物所特有的一类蛋白激酶，其C端的NAF/FISL结构域能与CBL相互作用使底物与激酶结构域结合。植物受到非生物胁迫后，体内Ca²⁺浓度发生改变形成Ca²⁺信号，CBL是Ca²⁺信号接收的直接受体，CBL蛋白本身无功能，当其接受到Ca²⁺信号，蛋白构象发生变化进而与CIPK特异性结合形成CBL-CIPK复合体，调控下游基因，响应逆境胁迫。此前CIPK25基因的相关研究很少，对紫花针茅SpCIPK25基因的研究尚未见报道。

发明内容

本发明的目的在于提供一种抗性基因SpCIPK25、蛋白、表达载体和应用，本发明提供的SpCIPK25基因可以提高植物的抗旱性和耐盐性。

为了实现上述目的，本发明提供了一种抗性基因SpCIPK25，所述抗性基因SpCIPK25的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。

本发明提供了所述的抗性基因SpCIPK25编码的SpCIPK25蛋白质，所述SpCIPK25蛋白质的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。

本发明还提供了一种表达载体，包括初始载体和上述技术方案所述的抗性基因SpCIPK25。

优选的，所述初始载体包括pRI101-GFP。

本发明还提供了所述抗性基因SpCIPK25、SpCIPK25蛋白质或上述技术方案所述的表达载体在提高植物抗旱性和/或耐盐性中的应用。

优选的，所述植物包括紫花针茅。

本发明还提供了一种抗旱性和/或耐盐性植物的培育方法，包括如下步骤：

将上述技术方案所述抗性基因SpCIPK25连接到pRI101-GFP，得到35S:SpCIPK25-GFP表达载体；

将所述35S:SpCIPK25-GFP表达载体转入到农杆菌中，得到工程菌；

将所述工程菌转入到植物中，得到抗旱性和/或耐盐性植物。

优选的，将所述抗性基因SpCIPK25连接到pRI101-GFP的SalI和EcoRI酶切位点之间。

优选的，所述SpCIPK25阳性克隆质粒的构建方法包括：

通过克隆得到，克隆所用的引物对包括SEQ ID No.3所示的上游引物，和SEQ IDNo.4所示的下游引物。

优选的，所述农杆菌包括农杆菌GV3101。

有益效果：