[发明专利]一种用于治疗SARS-CoV-2病毒感染的M蛋白多肽

说明书

本发明公开了一种用于治疗SARS‑CoV‑2病毒感染的M蛋白多肽，所述的M蛋白多肽为如SEQ ID NO.1所示的特异性抗原肽Msubgt;166‑184/subgt;，其氨基酸序列为KEITVATSRTLSYYKLGAS。其可应用在药学上可接受的盐或酯或前药上，利用M蛋白多肽Msubgt;166‑184/subgt;刺激HLA‑A*02:01、A*11:01和A*24:02分型的SARS‑CoV‑2感染康复者血液PBMC细胞，均能够检测到T细胞的强烈应答反应。本发明提出的M蛋白多肽Msubgt;166‑184/subgt;是SARS‑CoV‑2的M蛋白中对HLA‑A*02:01、A*11:01和A*24:02分型的理想表位，该多肽非常适用目前临床HLA‑A*02:01、A*11:01和A*24:02分型患者的SARS‑CoV‑2感染的治疗。

技术领域

本发明涉及免疫学和生物医药领域，具体地说是一种用于治疗SARS-CoV-2病毒感染的M蛋白多肽。

背景技术

多肽疫苗是按照病原体抗原基因中已知或预测的某段抗原表位的氨基酸序列，通过化学合成技术制备的肽段混合物。多肽疫苗具有抗病毒、抗肿瘤、抗细菌、抗寄生虫感染功能。由于多肽疫苗价廉、安全、特异性强、容易保存和应用的优点，越来越受到重视。

目前全球研发的SARS-CoV-2疫苗主要包括减毒活疫苗、灭活疫苗、病毒载体疫苗、重组蛋白疫苗、多肽疫苗、DNA疫苗、mRNA疫苗等，上述疫苗均可激活体液免疫产生中和性抗体，但是减毒活疫苗、灭活疫苗、病毒载体疫苗、重组蛋白疫苗、DNA疫苗、mRNA疫苗均无法清除已被病毒感染的细胞。而多肽疫苗可特异性激活T细胞免疫，清除已被病毒感染的细胞，另外，多肽疫苗还具有可快速合成，开发与制备周期较短，可预防、可治疗等优点，因此，本发明提出了一种用于治疗SARS-CoV-2病毒感染的M蛋白多肽。

发明内容

本发明之目的是弥补上述之不足，向社会公开合成方便的一种用于治疗SARS-CoV-2病毒感染的M蛋白多肽。

本发明的技术方案是这样实现的：

一种用于治疗SARS-CoV-2病毒感染的M蛋白多肽，所述的M蛋白多肽为如SEQ IDNO.1所示的特异性抗原肽M_166-184，其氨基酸序列为KEITVATSRTLSYYKLGAS。

一种用于治疗SARS-CoV-2病毒感染的M蛋白多肽的应用，应用在药学上可接受的盐或酯或前药，所述的盐或酯或前药包含M蛋白多肽M_166-184。

本发明M蛋白多肽的开发主要包括以下几个步骤：

步骤一、多肽预测的人工智能算法的优化：

基于人工智能算法和公共数据库中HLA肽段结合数据优化HLA亲和力肽段预测工具。

步骤二、利用人工智能算法预测并筛选对T细胞高亲和力的抗原肽段：

使用SARS-CoV-2病毒的M蛋白序列预测与I类HLA进行亲和力预测，基于肽段与HLA亲和力、肽段的水溶性、免疫原性等指标筛选与HLA结合IC50低于500nM、水溶性强、免疫原性强的9氨基酸(9-mer)肽段。最终筛选出4条9氨基酸肽段，分别在肽段两端分别延长5个氨基酸，形成19个氨基酸的肽段用于后续实验。

步骤三、利用化学合成法合成多肽：

利用化学合成法合成预测的SARS-CoV-2特异性多肽，每条肽段包含19个氨基酸，共4条肽段。

步骤四、收集新冠病毒感染康复者的全血，分离PBMC(peripheral bloodmononuclear cells)：

在某医院收集COVID-19康复患者的临床信息与全血样本，全血取于绿色抗凝管中，每个个体收集全血16ml，并于6小时内分离PBMC用于实验或-80℃冻存。