[发明专利]一种截头炭团菌发酵提取物及其应用

说明书

本发明涉及一种截头炭团菌（Annulohypoxylon annulatum）YIM F02299发酵提取物及其应用，属于微生物医药技术领域。本发明的截头炭团菌发酵提取物，由保藏号为CCTCC NO：M 2022115的一株截头炭团菌YIM F02299经过发酵方法制备得到，本发明的截头炭团菌发酵提取物对耐多药大肠杆菌具有较好的抑制活性，可应用于抑制耐多药大肠杆菌。本发明具有原料成本低，生产工艺简单的优点，在医药领域中具有潜在和实际的应用价值。

技术领域

本发明涉及一种截头炭团菌(Annulohypoxylon annulatum)YIM F02299发酵提取物及其应用，属于微生物医药技术领域。

背景技术

氨苄青霉素、卡拉霉素和链霉素是目前临床常用的抗菌抗生素，但由于抗生素的广泛使用，使得许多病原细菌产生了耐药性，这就迫使人们必须加快新抗菌药物的研发。世界卫生组织2021年发布的统计报告中指出：对于细菌的耐药性的增加与扩散，临床药物仍然缺乏。微生物种类繁多，其生物合成途径独特，是新药研发的重要资源。自1928年从青霉菌中发现青霉素以来，已从微生物中发现了大量的抗菌抗生素，为数众多的微生物源抗菌抗生素在临床感染疾病的治疗中起着非常重要的作用，大量筛选和利用拮抗耐多药大肠杆菌(能耐受氨苄青霉素、卡拉霉素和链霉素的大肠杆菌)的有益微生物是当今药物研发的热点。

发明内容

本发明的目的是提供一种截头炭团菌(A.annulatum)YIM F02299发酵提取物及其应用。

本发明是这样实现的：

1.本发明截头炭团菌发酵提取物的生产菌株是截头炭团菌(A.annulatum)YIMF02299，该菌株已于2022年2月14日保藏于中国典型培养物保藏中心，地址：中国武汉市武汉大学，保藏号为CCTCC NO：M 2022115。

2.本发明截头炭团菌(A.annulatum)YIM F02299发酵提取物的制备方法包括以下步骤：

(1)试管种培养：将菌株YIM F02299接种到试管固体培养基斜面上，于28℃下培养7天，获得试管种；所述固体培养基为PDA培养基，培养基制备方法是马铃薯200g去皮后切块，加水1000ml煮沸20分钟后过滤，得到的滤液中加入葡萄糖20g，琼脂20g，加水定容至1000ml，121℃灭菌40分钟；

(2)液体种子培养：先配制液体种子培养基，液体种子培养基为PDB培养基，PDB培养基制备方法是：马铃薯200g去皮后切块，加水1000ml煮沸20分钟后过滤，得到的滤液中加入葡萄糖20g，加水定容至1000ml，在每个500ml三角瓶中装入100ml液体种子培养基，121℃灭菌40分钟，冷却后接入1cm²大的试管种，28℃下于转速为190rpm的摇床上培养3天得到种子液；

(3)制备截头炭团菌发酵提取物：先配制液体发酵培养基，液体发酵培养基为PDB培养基，PDB培养基制备方法同步骤(2)；在每个1000ml三角瓶中装入200ml液体发酵培养基，121℃灭菌40分钟，冷却后接入20ml步骤(2)得到的种子液，28℃下于转速为190rpm的摇床上培养7天得菌株发酵液；在菌株发酵液中加入等体积乙醇，经摇床振荡6小时后滤去菌丝体，蒸去发酵液中的乙醇得到菌株发酵粗提物，将该发酵粗提物用水稀释到原发酵液体积，即制成截头炭团菌发酵提取物。

本发明所述的截头炭团菌发酵提取物应用于抑制耐多药大肠杆菌。

本发明提供了一种截头炭团菌发酵提取物的制备方法，并将该发酵提取物应用于抑制耐多药大肠杆菌。平板抑菌试验结果表明，用本发明方法制备得到的截头炭团菌发酵提取物对耐多药大肠杆菌的抑菌圈直径平均为13.0mm，表明该发酵提取物对耐多药大肠杆菌具有较强的抑制活性，利用本发明提供的截头炭团菌发酵提取物可有效地应用于抑制耐多药大肠杆菌。