[发明专利]清上蠲痛汤特征图谱的构建方法

权利要求书

1.一种清上蠲痛汤特征图谱的构建方法，其特征在于，包含以下步骤：

（1）配制供试品溶液和对照品溶液：所述对照品为绿原酸、阿魏酸、紫花前胡苷、3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸、黄芩苷、汉黄芩苷、汉黄芩素、蔓荆子黄素和藁本内酯；

所述供试品以水或甲醇-水溶液溶解；

（2）检测：

采用超高效液相色谱仪构建所述特征图谱，色谱条件：十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱，流动相A：甲醇、流动相B：乙腈、流动相C：0.05%~0.1%的甲酸水溶液，按如下的洗脱梯度进行洗脱：

检测波长：240~360 nm，流速：0.25~0.35 mL/min；柱温：23 ℃~30 ℃；

（3）以黄芩苷为基准峰，计算各特征峰的相对保留时间。

2.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述各特征峰的相对保留时间如下：

绿原酸：0.26~0.32，阿魏酸：0.48~0.57，紫花前胡苷：0.68~0.83，3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸：0.73~0.89，黄芩苷：1.00，汉黄芩苷：1.12~1.44，汉黄芩素：1.58~1.93，蔓荆子黄素：1.60~1.96，藁本内酯：1.63~1.99。

3.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述供试品经过如下前处理再配制为溶液：

以水或甲醇-水溶液，50 mL/1 g供试品用量，溶解。

4.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述对照品溶液的浓度如下：

绿原酸：25 μg/mL，阿魏酸：10 μg/mL，紫花前胡苷：50 μg/mL，3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸：20 μg/mL，黄芩苷：750 μg/mL，汉黄芩苷：190 μg/mL，汉黄芩素：10 μg/mL，蔓荆子黄素：5 μg/mL，藁本内酯：10 μg/mL。

5.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述色谱柱为C18色谱柱，柱长为100~150 mm，色谱柱填料粒径为1.7~1.9 μm。

6.根据权利要求5所述的构建方法，其特征在于，所述C18色谱柱选自2.1×100 mm 1.8μm的ZORBAX Eclispse Plus C18 RRHD色谱柱、2.1×100 mm 1.9 μm的InfinityLabPoroshell 120 EC-C18色谱柱或2.1×150 mm 1.7μm的ACQUITY UPLC BEHShield RP18色谱柱。

7.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述供试品溶液检测的进样量为1 µL。