[发明专利]SLC39A13基因rs755555位点的应用及其检测引物和探针组合、试剂盒

权利要求书

1.一种用于检测SLC39A13基因rs755555位点的试剂在制备精子活力判定试剂盒中的应用，SLC39A13基因rs755555位点在人群中存在C和T两种等位基因，携带C等位基因的人群精子活力低于T等位基因。

2.一种检测SLC39A13基因rs755555位点基因型的引物和探针的组合物，其特征在于，包括引物对和探针对，所述引物对的序列如下：

上游引物F:5′-CTCCTAAGAAGAGCAGCAGCAT-3′,

下游引物R:5′-TGCTTGTCATTCCCCTAGAGAT-3′;

所述探针对序列如下：

C等位基因探针:5′-CAGCCCTGGGCGCCAC-3′,

T等位基因探针：5′-CCAGCCCTGGGCACCAC-3′。

3.如权利要求2所述的引物和探针的组合物，其特征在于，所述C等位基因探针为：5′FAM-CAGCCCTGGGCGCCAC-3′BHQ1;所述T等位基因探针为：5′Texas Red-CCAGCCCTGGGCACCAC-3′BHQ1。

4.权利要求2或3所述的引物和探针的组合物在制备检测SLC39A13基因rs755555位点基因型试剂盒中的应用。

5.一种用于检测SLC39A13基因rs755555位点基因型的试剂盒，其特征在于，包含权利要求2或3所述的引物和探针的组合物。

6.一种利用权利要求5所述的试剂盒非诊断性检测SLC39A13基因rs755555位点基因型的方法，其特征在于，包括如下步骤：以待测样本的基因组DNA为模板，用所述试剂盒进行PCR扩增，并在扩增过程中进行实时荧光检测。

7.如权利要求6所述的非诊断性检测SLC39A13基因rs755555位点基因型的方法，其特征在于：所述PCR扩增的体系包括以下试剂及用量：

试剂用量

2× AceQ Probe Master mix10μL，

10μmol/L上游引物F0.2μL，

10μmol/L下游引物R0.2μL，

10μmol/L C等位基因探0.1μL，

10μmol/L T等位基因探0.1μL，

DNA模板10ng-100ng，

去离子水补足至20μL。

8.如权利要求6所述的非诊断性检测SLC39A13基因rs755555位点基因型的方法，其特征在于：所述PCR扩增的条件为：95℃预变性5min；95℃变性10s，66℃延伸30s，共进行40个循环。

9.如权利要求6所述的非诊断性检测SLC39A13基因rs755555位点基因型的方法，其特征在于：如果rs755555位点中只有C等位基因，则实时荧光检测只显示C等位基因的荧光信号；如果rs755555位点中只有T等位基因，则实时荧光检测只显示T等位基因的荧光信号；如果rs755555位点中是C/T杂合基因型，则实时荧光检测同时显示C等位基因和T等位基因的两种荧光信号。