[发明专利]一种制备高纯度半乳糖二酸的方法在审
申请号: | 202210376891.5 | 申请日: | 2022-04-11 |
公开(公告)号: | CN114934079A | 公开(公告)日: | 2022-08-23 |
发明(设计)人: | 华夏;徐勇;周鑫;韩健;张宸珲 | 申请(专利权)人: | 南京林业大学 |
主分类号: | C12P7/58 | 分类号: | C12P7/58;C12N13/00;C12N1/20;C12R1/01 |
代理公司: | 南京智转慧移知识产权代理有限公司 32649 | 代理人: | 王伟 |
地址: | 210037 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 制备 纯度 半乳糖 方法 | ||
1.一种制备高纯度半乳糖二酸的方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)以果胶为底物,采用果胶酶进行酶水解生产制备半乳糖醛酸;
2)实时监测反应体系中半乳糖醛酸生成量,至反应体系中半乳糖醛酸的浓度不再增加停止反应,离心酶解液后将上清液转移至双极膜电渗析系统的料室中进行分离纯化;
3)当电渗析系统盐室中电导率将至100~200μs/cm时,分离过程完成;将酸室中的溶液转移至生物反应器中,并接入氧化葡萄糖酸杆菌进行静息细胞催化生产获得高纯度半乳糖二酸溶液。
2.根据权利要求1所述的制备高纯度半乳糖二酸的方法,其特征在于,果胶的浓度为4~5g/L。
3.根据权利要求1所述的制备高纯度半乳糖二酸的方法,其特征在于,果胶酶的用量为底物质量的4%~5%。
4.根据权利要求1所述的制备高纯度半乳糖二酸的方法,其特征在于,酶水解反应条件为:控制反应温度为50~55℃,pH为3.8~4.2。
5.根据权利要求1所述的制备高纯度半乳糖二酸的方法,其特征在于,控制电渗析设备电压20~30V,电流5A以下。
6.根据权利要求1所述的制备高纯度半乳糖二酸的方法,其特征在于,氧化葡萄糖酸杆菌的接入量为8~10g/L。
7.根据权利要求1所述的制备高纯度半乳糖二酸的方法,其特征在于,静息细胞阶段反应条件为:控制反应温度为28~30℃,搅拌转速为500~550rpm,pH为4.0~4.5。
8.根据权利要求1所述的制备高纯度半乳糖二酸的方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)在震荡反应体系中,加入4g/L的底物基质果胶,接入4%果胶酶进行酶水解生产半乳糖醛酸混合液;实时监测反应体系中半乳糖醛酸生成量,并通过氢氧化钠控制反应pH 3.8~4.2;
(2)至震荡反应体系中半乳糖醛酸的浓度不再增加停止反应,离心酶解液后将上清液转移至双极膜电渗析系统的料室中进行分离纯化,至电渗析系统盐室中电导率将至100~200μs/cm时,分离过程完成,于酸室获得高纯度半乳糖醛酸溶液;
(3)将酸室中的半乳糖醛酸溶液转移至1L生物反应器中,并接入10g/L氧化葡萄糖酸杆菌进行静息细胞催化生产半乳糖二酸;实时监测反应体系中半乳糖二酸生成量,并控制反应体系pH 4.0~4.5。
9.一种制备高纯度半乳糖二酸的方法,其特征在于:以半乳糖醛酸为底物,接入氧化葡萄糖酸杆菌进行静息细胞催化,生产获得高纯度半乳糖二酸溶液;其中,反应条件为:反应温度28~30℃,搅拌转速为500~550rpm,pH为4.0~4.5。
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