[发明专利]一种利用胞外聚合物抑制抗生素抗性基因转化的方法

权利要求书

1.一种利用胞外聚合物抑制抗生素抗性基因转化的方法，其特征在于：

在含有感受态菌和抗生素抗性基因的微生物培养体系中加入胞外聚合物，以抑制抗生素抗性基因通过转化方式进入微生物胞内；

或者，在含有感受态菌和抗生素抗性基因的微生物培养体系中分别加入胞外聚合物组分以及不同氧化还原状态的胞外聚合物，抑制抗生素抗性基因的转化过程；

所述胞外聚合物组分为腐殖质、多糖或蛋白质；

所述不同氧化还原状态的胞外聚合物通过电化学方法获得，利用电化学工作站分别对胞外聚合物进行氧化或还原获得氧化态和还原态的胞外聚合物。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：

所述胞外聚合物来源于曝气池活性污泥，为活性污泥经加热提取后获得的产物。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：

在微生物培养体系中加入胞外聚合物后，胞外聚合物在体系中的终浓度为10mg/L。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：

所述感受态菌为大肠杆菌；所述抗生素抗性基因为携带有四环素抗性的pBR322质粒。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：

在微生物培养体系中分别加入胞外聚合物组分以及不同氧化还原状态的胞外聚合物后，体系中胞外聚合物组分的终浓度为0.1-10mg/L，不同氧化还原状态的胞外聚合物的终浓度为10mg/L。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述胞外聚合物是通过包括如下步骤的方法获得：

从污水厂取样获得活性污泥，将活性污泥用NaCl溶液清洗之后，在一定温度下进行加热提取，然后高速离心获得上清液；所得上清液经过膜过滤获得滤液；将滤液冷冻干燥即可获得胞外聚合物。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于：

所述NaCl溶液的浓度为0.9％。

8.根据权利要求6所述的方法，其特征在于：

所述加热提取的温度为60℃，提取时间为60min。

9.根据权利要求6所述的方法，其特征在于：

所述高速离心的离心转速为10000rpm，时间为10min。

10.根据权利要求6所述的方法，其特征在于：

所述膜过滤采用0.22-μm的醋酸纤维膜。