[发明专利]一种辅助鉴定棉花抗旱性的方法在审
申请号: | 202210378817.7 | 申请日: | 2022-04-12 |
公开(公告)号: | CN114839207A | 公开(公告)日: | 2022-08-02 |
发明(设计)人: | 叶武威;徐楠;张红;王俊娟;韩明格;黄慧;陆许可;陈修贵;王帅;陈超 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院棉花研究所 |
主分类号: | G01N23/04 | 分类号: | G01N23/04;G01N23/20;G01N23/20008 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 王春霞 |
地址: | 455000 *** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 辅助 鉴定 棉花 抗旱性 方法 | ||
本发明公开了一种辅助鉴定棉花抗旱性的方法。所述方法包括如下步骤:在培养箱中培养棉花至至少三叶一心期,进行自然干旱胁迫处理;当土壤含水量降至1~2%时取样,采用透射电镜观察棉花叶片的内质网结构,若出现圆环状的螺纹结构,则棉花具有抗旱性;根据出现的所述螺纹结构的多少,判定所述棉花的抗旱性强弱:所述螺纹结构越多,抗旱性越差。本发明通过透射电镜对棉花干旱胁迫处理下的内质网结构进行了观察,将棉花干旱胁迫在内质网结构方面紧密地联系在了一起。内质网特异性的螺纹可以作为棉花干旱胁迫在内质网结构中的标志,在不同干旱程度下,内质网出现螺纹的多少可以作为鉴定品种抗旱性的辅助。
技术领域
本发明涉及一种辅助鉴定棉花抗旱性的方法,属于生物医药技术领域。
背景技术
干旱是限制生物圈中高等植物生长,发育和分布的主要因素之一,土壤干旱和大气干燥都可能导致植物水分流失。一般认为,响应干旱胁迫时植物各部分的形态特征表现出了不同的可塑性,这些差异主要表现在叶片大小、叶片形态、根系发达程度等方面。而内质网作为蛋白质加工的重要场所,逆境条件下会导致内质网胁迫,加剧未折叠和错误折叠蛋白质的积累。
发明内容
本发明的目的是提供一种辅助鉴定棉花抗旱性的方法,本发明通过在抗旱胁迫下内质网结构的变化进行辅助鉴定:出现的螺纹结构,本发明棉花干旱胁迫与内质网超微结构紧密联系起来。
本发明所提供的辅助鉴定棉花抗旱性的方法,包括如下步骤:
在培养箱中培养棉花至至少三叶一心期,进行自然干旱胁迫处理;当土壤含水量降至1~2%时取样,采用透射电镜观察棉花叶片的内质网结构,若出现圆环状的螺纹结构,则棉花具有抗旱性;同时以正常生长的幼苗作为对照。
具体地,根据出现的所述螺纹结构的多少,判定所述棉花的抗旱性强弱:所述螺纹结构越多,抗旱性越差。
上述的方法中,所述培养条件为:
光照12~16h,温度为25~28℃;
黑暗8~12h,温度为23~25℃。
上述的方法中,所述土壤含水量采用烘干称重法测定;
如:采用0.1g精准的天平称取土样的重量,记作土样的湿重M,在105℃的烘箱内将土样烘8h至恒重,烘干后立即测定烘干土样,记作土样的干重Ms;
土壤含水量=(烘干前铝盒及土样质量-烘干后铝盒及土样的质量)/(烘干后铝盒及土样质量-烘干空铝盒质量)×100%。
上述的方法中,取样过程如下:将叶片切成长度和宽度均为1~5mm的多个叶块,均来自于同一个叶片,然后立即放入固定液中;。
取样时,应动作轻巧,器械锋利,每切一次叶片应更换一个刀片,并要避免对组织的挤压。
上述的方法中,所述固定液为戊二醛固定液与高锰酸钾水溶液的混合溶液,pH值为6.8~7.2;
所述固定液中,所述戊二醛固定液的体积含量为48~50%,所述高锰酸钾水溶液的体积含量为50~52%;
所述固定液放置在4℃冰箱备用;
上述的方法中,采用日立Hitachi 7800透射电镜进行观察。
通过本发明方法发现了棉花干旱胁迫下特殊的内质网螺纹结构,其在辅助鉴定棉花抗旱性强弱中的应用也属于本发明的保护范围。
本发明通过透射电镜对棉花干旱胁迫处理下的内质网结构进行了观察,将棉花干旱胁迫在内质网结构方面紧密地联系在了一起。内质网特异性的螺纹可以作为棉花干旱胁迫在内质网结构中的标志,在不同干旱程度下,内质网出现螺纹的多少可以作为鉴定品种抗旱性的辅助。
附图说明
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