[发明专利]一种从裂壶藻废渣中提取外泌体的方法在审
| 申请号： | 202210381559.8 | 申请日： | 2022-04-13 |
| 公开（公告）号： | CN114606133A | 公开（公告）日： | 2022-06-10 |
| 发明（设计）人： | 韩大雄;陈茂立;叶国栋;董康梅;许剑雄;王海燕;杨燕燕;张志荣 | 申请（专利权）人： | 厦门大学;厦门生命互联科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N1/12 | 分类号： | C12N1/12;C12R1/89 |
| 代理公司： | 厦门市精诚新创知识产权代理有限公司 35218 | 代理人： | 秦华 |
| 地址： | 361000 *** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 裂壶藻 废渣 提取 外泌体 方法 | ||
1.一种从裂壶藻废渣中提取外泌体的方法，其特征在于，包括如下步骤：
前处理：裂壶藻藻渣用弱碱水处理，再过滤收集滤液，滴加中和试剂至中性；
分离提取：加入PBS混匀后第一次离心，取上清液第二次离心；第二次离心的转速高于第一次离心；滤膜过滤；第三次离心后重悬沉淀，再第四次离心，取其沉淀即为外泌体；第三和第四次离心的转速均高于第二次离心。
2.如权利要求1所述从裂壶藻废渣中提取外泌体的方法，其特征在于，所述裂壶藻藻渣为工业化提取油脂后的裂壶藻的藻渣。
3.如权利要求1所述从裂壶藻废渣中提取外泌体的方法，其特征在于，所述弱碱水为饱和碳酸氢钠溶液。
4.如权利要求1所述从裂壶藻废渣中提取外泌体的方法，其特征在于，所述中和试剂为醋酸。
5.如权利要求1所述从裂壶藻废渣中提取外泌体的方法，其特征在于，所述前处理中，加入弱碱水的量为，固液体积比为1：10～30。
6.如权利要求1所述从裂壶藻废渣中提取外泌体的方法，其特征在于，所述第一次离心的条件为1℃～25℃，1000×g～6000×g，离心10min～100min。
7.如权利要求1所述从裂壶藻废渣中提取外泌体的方法，其特征在于，所述第二次离心的条件为1℃～25℃，10,000×g～60,000×g，离心30min～100min。
8.如权利要求1所述从裂壶藻废渣中提取外泌体的方法，其特征在于，所述第三次离心的条件为1℃～25℃，大于100,000×g，离心30min～300min。
9.如权利要求1所述从裂壶藻废渣中提取外泌体的方法，其特征在于，所述滤膜为微孔滤膜。
10.如权利要求1所述从裂壶藻废渣中提取外泌体的方法，其特征在于，所述第四次离心的条件为1℃～25℃，大于100,000×g，离心30min～300min。
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