[发明专利]一种预防及治疗酒精致癌的组合物及其制备方法

权利要求书

1.一种预防及治疗酒精致癌的组合物的制备方法，其特征在于，具体包括以下步骤：

S1.大豆的脱毒预处理：将大豆洗净、干燥后，放置于上层筛网，将乙醇、乙酸和氨水的混合液装入容器中，其中，乙醇、乙酸和NH₃·H₂O的质量分数为5-12wt%、2-7wt%和3-5wt%，加盖并安装冷凝管，加热至70-90℃，蒸汽处理0.5-2h，洗净，干燥，粉碎，得到脱毒大豆粉；

S2.牛樟芝的处理：将牛樟芝洗净，干燥，粉碎，得到牛樟芝粉；

S3.酶解：将20-40重量份步骤S1制得的脱毒大豆粉和15-22重量份步骤S2制得的牛樟芝粉混合均匀后，加入100重量份去离子水中，加入1-2重量份复合酶酶解，复合酶为菠萝蛋白酶和中性纤维素酶，质量比为（3-5）：4，在300-500W微波下灭酶处理1-3min，过滤，滤液冷冻干燥，得到酶解产物，滤渣留用；

S4.培养基的制备：将12-20重量份碳源、5-12重量份氮源、2-4重量份维生素和2-5重量份无机盐用100重量份水溶解，混合均匀后，用PBS溶液调节培养基pH值为6.5-7.2，灭菌，分成4份备用；

所述碳源选自糖蜜、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖、果糖、水溶性淀粉中的一种或几种混合；所述氮源选自氨水、尿素、铵盐、硝酸盐、氨基酸、蛋白胨、鱼粉；所述氨基酸选自苯丙氨酸、丝氨酸、赖氨酸、苏氨酸、甘氨酸、缬氨酸、色氨酸、亮氨酸、丙氨酸、半胱氨酸、甲氨酸、异亮氨酸中的一种或几种混合；所述维生素选自维生素C、维生素B1、维生素B2、维生素B6、维生素B12、维生素A、维生素K、维生素B12、维生素D、维生素E中的一种或几种混合；所述无机盐选自氯化钠、氯化钾、氯化钙、硫酸镁、氯化铁、硫酸锌、硫酸铜、硫酸锰、氯化锌、氯化铜、氯化锰中的一种或几种混合；

S5.第一复合发酵菌液的制备：将纳豆芽孢杆菌、红曲霉接种到高氏培养基中，纳豆芽孢杆菌、红曲霉的质量比为（5-10）：7，35-40℃温度下培养12-18h，培养成菌种种子液，含菌量为10⁷-10⁸cfu/mL，分别接种于步骤S4制得的培养基中，接种量分别为1-3%和2-4%，35-40℃温度下培养24-48h，将两个培养基等体积混合并稀释100-200倍得到第一复合发酵菌液；

S6.第一次发酵：将步骤S3中的滤渣加入步骤S5中的第一复合发酵菌液中，固液比为1：（5-10）g/mL，36-38℃温度下恒温发酵48-72h，过滤，滤液冷冻干燥，得到第一次发酵产物，滤渣留用；

S7.益生元的制备：将2-7重量份低聚异麦芽糖、1-3重量份L-阿拉伯糖、2-5重量份菊粉和10重量份变性淀粉混合均匀，研细，过100-200目筛，得到益生元；

S8.第二复合发酵菌液的制备：将植物乳杆菌、青春双歧杆菌接种到高氏培养基中，植物乳杆菌、青春双歧杆菌的质量比为（3-7）：5，35-40℃温度下培养16-24h，培养成菌种种子液，含菌量为10⁷-10⁸cfu/mL，分别接种于步骤S4制得的培养基中，接种量分别为3-5%和2-6%，35-40℃温度下培养24-48h，将两个培养基等体积混合并稀释100-200倍得到第二复合发酵菌液；

S9.第二次发酵：将2-3重量份步骤S7制得的益生元、10重量份步骤S6中的滤渣加入20-50重量份步骤S8中的第二复合发酵菌液中，36-38℃温度下恒温发酵48-72h，冷冻干燥，得到第二次发酵产物；

S10.预防及治疗酒精致癌的组合物的制备：将5-10重量份步骤S3制得的酶解产物、12-20重量份步骤S6制得的第一次发酵产物和50重量份步骤S9制得的第二次发酵产物混合均匀后，加入3-5重量份玉米低聚肽、1-2重量份牛磺酸，混合均匀，得到预防及治疗酒精致癌的组合物。

2.一种如权利要求1所述制备方法制得的预防及治疗酒精致癌的组合物。