[发明专利]一种提高种子在黑暗和盐胁迫条件下萌发率的拟南芥PIF1基因及其应用在审
申请号: | 202210387692.4 | 申请日: | 2022-04-13 |
公开(公告)号: | CN114836432A | 公开(公告)日: | 2022-08-02 |
发明(设计)人: | 刘栋;曾明阳;李家增;霍云馨;王泽泉;许翠康 | 申请(专利权)人: | 江西农业大学 |
主分类号: | C12N15/29 | 分类号: | C12N15/29;C12Q1/6895;C12Q1/6851;C12N15/11 |
代理公司: | 南昌洪达专利事务所 36111 | 代理人: | 刘凌峰 |
地址: | 330000 江*** | 国省代码: | 江西;36 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 提高 种子 黑暗 胁迫 条件下 萌发 拟南芥 pif1 基因 及其 应用 | ||
1.一种提高种子在黑暗和盐胁迫条件下萌发率的拟南芥PIF1基因,其特征在于:所述拟南芥PIF1基因的序列如SEQ ID NO:1所示。
2.一种如权利要求1所述的拟南芥PIF1基因的应用,其特征在于:通过PCR扩增的方法鉴定pif1为T-DNA插入的功能缺失型突变体,利用野生型拟南芥Col和pif1为试验材料,统计其在黑暗和盐胁迫条件下种子的萌发率,并通过实时荧光定量PCR的方法检测盐胁迫响应标记基因的表达水平,进一步证实pif1突变体种子在萌发阶段对盐胁迫的敏感性显著降低。
3.根据权利要求2所述的一种拟南芥PIF1基因的应用,其特征在于:T-DNA插入功能缺失型突变体的鉴定方法,具体操作步骤如下,
(1)提取野生型拟南芥Col和pif1突变体萌发48小时种子的DNA;
(2)以DNA为模板,在pif1突变体T-DNA插入位点的两侧设计PIF1的特异性引物序列;
其中所设计的PCR扩增引物序列如下:
上游引物:5’-GACAGTTCCGCCGTAGCTGG-3’
下游引物:5’-AGCAGCACGAGATCTCTTGG-3’;
(3)以提取的DNA为模板进行PCR扩增,然后对产物进行琼脂糖凝胶电泳。
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