[发明专利]一种提高种子在黑暗和盐胁迫条件下萌发率的拟南芥PIF1基因及其应用在审

专利信息
申请号: 202210387692.4 申请日: 2022-04-13
公开(公告)号: CN114836432A 公开(公告)日: 2022-08-02
发明(设计)人: 刘栋;曾明阳;李家增;霍云馨;王泽泉;许翠康 申请(专利权)人: 江西农业大学
主分类号: C12N15/29 分类号: C12N15/29;C12Q1/6895;C12Q1/6851;C12N15/11
代理公司: 南昌洪达专利事务所 36111 代理人: 刘凌峰
地址: 330000 江*** 国省代码: 江西;36
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摘要:
搜索关键词: 一种 提高 种子 黑暗 胁迫 条件下 萌发 拟南芥 pif1 基因 及其 应用
【权利要求书】:

1.一种提高种子在黑暗和盐胁迫条件下萌发率的拟南芥PIF1基因,其特征在于:所述拟南芥PIF1基因的序列如SEQ ID NO:1所示。

2.一种如权利要求1所述的拟南芥PIF1基因的应用,其特征在于:通过PCR扩增的方法鉴定pif1为T-DNA插入的功能缺失型突变体,利用野生型拟南芥Col和pif1为试验材料,统计其在黑暗和盐胁迫条件下种子的萌发率,并通过实时荧光定量PCR的方法检测盐胁迫响应标记基因的表达水平,进一步证实pif1突变体种子在萌发阶段对盐胁迫的敏感性显著降低。

3.根据权利要求2所述的一种拟南芥PIF1基因的应用,其特征在于:T-DNA插入功能缺失型突变体的鉴定方法,具体操作步骤如下,

(1)提取野生型拟南芥Col和pif1突变体萌发48小时种子的DNA;

(2)以DNA为模板,在pif1突变体T-DNA插入位点的两侧设计PIF1的特异性引物序列;

其中所设计的PCR扩增引物序列如下:

上游引物:5’-GACAGTTCCGCCGTAGCTGG-3’

下游引物:5’-AGCAGCACGAGATCTCTTGG-3’;

(3)以提取的DNA为模板进行PCR扩增,然后对产物进行琼脂糖凝胶电泳。

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