[发明专利]靶向RAGE的纳米抗体及其应用

说明书

本发明提供了一种靶向RAGE的纳米抗体及其应用，所述靶向RAGE的纳米抗体的氨基酸序列的互补决定区为如SEQ ID NO:16所示的CDR1、如SEQ ID NO:18所示的CDR2、如SEQ ID NO:20所示的CDR3。本发明的技术方案的纳米抗体，与RAGE有较强结合，可以阻断RAGE与各种受体的相互作用，对AD和癌症产生治疗效果。

技术领域

本发明属于免疫学或分子生物学技术领域，尤其涉及一种靶向RAGE的纳米抗体及其应用。

背景技术

RAGE(the receptor for advanced glycation end products)，中文名称为晚期糖基化终末产物受体，是糖化终产物(advanced glycation end products，AGEs)的细胞表面受体。细胞和组织内的AGEs积累是衰老的重要分子特征，当细胞内蛋白存活时间过长时，AGE蛋白修饰就会发生，从而导致修饰后的蛋白相互交联失去功能。AGE修饰是一个不可逆的过程，随着时间推移，AGEs积累增多，RAGE通路被激活，并导致RAGE的表达不断升高。除AGE外，疾病发生过程中的重要蛋白如阿尔茨海默症(AD)相关的Abeta蛋白和癌症相关的HMGB1蛋白都被证实为RAGE的配体，且这些配体-受体信号通路对疾病预测和疾病发展关系密切。

RAGE在AD疾病进展中主要在血液循环系统和中枢神经系统中发挥作用。在血液循环系统中，RAGE可作为Abeta受体促进其向大脑中的转运，从而引起Abeta沉积；在中枢神经系统中，RAGE激活可以促进神经炎性反应、Abeta生成增加、和tau磷酸化加剧，是AD病理改变的关键调控因子。在AD动物模型和AD病人中，RAGE的表达水平都显著升高，且有证据表明RAGE表达量升高是先于Abeta plaque发生的。这些结果暗示了RAGE激活可能是衰老相关的生理改变向AD病理改变的关键因素。

纳米抗体可通过靶向各种疾病重要靶点，阻断或激活相应靶蛋白和信号通路，从而起到治疗作用，Caplacizumab是第一款经美国FDA批准的用于治疗血栓性血小板减少性紫癜的纳米抗体药物(acquired Thrombotic Thrombocytopenic Purpura，aTPP)。此外，纳米抗体还可以作为靶向工具，在体内帮助药物或者诊断分子定位到疾病相关靶蛋白，其中靶向肿瘤生物标记物的纳米抗体被不断鉴定出来，如EGFR1或EGFR2(或分别为HER1和HER2)、VEGFR2、c-Met和CXCR7等蛋白的纳米抗体已经被报道。但到目前为止，尚未见到靶向RAGE的纳米抗体被发现。

此外，在恶性肿瘤(包括肾癌、前列腺癌、胃癌、乳腺癌和结肠癌等)中，RAGE的表达水平显著升高，这一现象被证实与癌症的转移和不良预后相关，因此RAGE也可以作为癌症诊断标志物，将RAGE纳米抗体与具有成像效果的纳米材料结合，具有癌症成像诊断的应用价值。肿瘤发展过程中高表达的HMGB1被证实通过结合RAGE受体激活p38 MAPK，p42/p44，以及JNK等信号通路，进而激活纤维蛋白溶解酶，使得癌细胞更易发生迁徙和转移。癌细胞中AGE-RAGE信号通路还影响了细胞凋亡、坏死和自噬，通过抑制RAGE受体的激活，可以增加细胞凋亡，并减少癌细胞抗药性的产生。因此，基于RAGE纳米抗体的靶向性药物也具有癌症临床治疗的应用价值。

发明内容

针对以上技术问题，本发明公开了一种靶向RAGE的纳米抗体及其应用，与RAGE具有很强的结合力，可以用于有关阿尔茨海默症和癌症的RAGE的各种成像和治疗的药物。

对此，本发明采用的技术方案为：

靶向RAGE的纳米抗体，所述靶向RAGE的纳米抗体的氨基酸序列的互补决定区为如SEQ ID NO:16所示的CDR1、如SEQ ID NO:18所示的CDR2、如SEQ ID NO:20所示的CDR3。具体而言，如SEQ ID NO:16所示的CDR1序列为：VVSGFTFRSYAMS，如SEQ ID NO:18所示的CDR2序列为：WVSAITSGGESTS，如SEQ ID NO:20所示的CDR3序列为：RRVGSPGS。