[发明专利]一种基于酶解的尿素检测方法及其应用在审
申请号: | 202210395597.9 | 申请日: | 2022-04-14 |
公开(公告)号: | CN114739933A | 公开(公告)日: | 2022-07-12 |
发明(设计)人: | 刘巍;李永阳;高一乔;倪天军;上官璟芳;闫慧娟 | 申请(专利权)人: | 新乡医学院 |
主分类号: | G01N21/33 | 分类号: | G01N21/33;G01N21/78;G01N1/38 |
代理公司: | 北京五洲洋和知识产权代理事务所(普通合伙) 11387 | 代理人: | 刘素霞;李璐 |
地址: | 453003*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 基于 尿素 检测 方法 及其 应用 | ||
1.一种基于酶解的尿素检测方法,其特征在于,所述检测方法包括以下步骤:
步骤一,将EDTA溶液与HAuCl4溶液混合,将混合溶液剧烈搅拌,离心分离,取上清液备用,即AuNPs溶液;
步骤二,在所述AuNPs溶液中加入NaCl溶液和脲酶溶液,均匀混合,得到检测溶液;
步骤三,在所述检测溶液中加入待测尿素溶液,形成混合液,然后在室温下静置后,观察颜色变化并测定所述混合液的紫外可见吸收光谱。
2.如权利要求1所述的基于酶解的尿素检测方法,其特征在于,所述EDTA溶液的浓度为0.70-50mmol/L;所述HAuCl4溶液的浓度为0.10-5.0mmol/L。
3.如权利要求2所述的基于酶解的尿素检测方法,其特征在于,所述HAuCl4溶液与所述EDTA溶液的摩尔浓度比为1:(7-10)。
4.如权利要求1所述的基于酶解的尿素检测方法,其特征在于,步骤一中,制备的所述AuNPs的浓度为0.02-1.0g/L。
5.如权利要求1所述的基于酶解的尿素检测方法,其特征在于,步骤三中,所述混合液中NaCl的终浓度为10-100mmol/L,所述脲酶的终浓度为20-100U/L,所述AuNPs的终浓度为12-600mg/L。
6.如权利要求1所述的基于酶解的尿素检测方法,其特征在于,步骤一中,将混合溶液在20-40℃下剧烈搅拌20-40min后再离心分离。
7.如权利要求6所述的基于酶解的尿素检测方法,其特征在于,所述离心分离具体为在10000rpm离心5分钟。
8.如权利要求1~7任一项所述的基于酶解的尿素检测方法,其特征在于,所述检测方法还包括步骤四,设置梯度浓度的尿素溶液,加入到所述检测溶液中,制备成多个混合液,通过紫外可见分光光度仪测试出不同浓度的尿素溶液在520nm处的吸光度值,绘制出尿素浓度-吸光度标准曲线,根据测量的待测尿素溶液的吸光度值与所述标准曲线比对得到待测尿素溶液的浓度。
9.一种如权利要求1~8任一项所述的基于酶解的尿素检测方法的应用,其特征在于,所述检测方法用于检测人体液中或环境水体中的尿素含量。
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