[发明专利]一种重组anti-miR-129-5p及其制备方法和在抗皮肤衰老中的应用在审
申请号: | 202210400751.7 | 申请日: | 2022-04-17 |
公开(公告)号: | CN114854744A | 公开(公告)日: | 2022-08-05 |
发明(设计)人: | 董永花;张伟杰 | 申请(专利权)人: | 吉布森生物科技(陕西)有限公司 |
主分类号: | C12N15/113 | 分类号: | C12N15/113;C12N15/11;C12N15/10;A61K8/60;A61Q19/08 |
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地址: | 710065 陕西省西安*** | 国省代码: | 陕西;61 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 重组 anti mir 129 及其 制备 方法 皮肤 衰老 中的 应用 | ||
1.一种重组基因,其特征在于,所述重组基因的序列为SEQ ID NO:1。
2.如权利要求1所述的重组基因,其特征在于,所述重组基因的序列为与SEQ ID NO:1所示序列相似度达90%以上的序列。
3.一种应用如权利要求1所述的重组基因的制备方法,其特征在于,所述重组基因的制备方法包括:
根据genebank数据库中设计anti-miR-129-5p引物并进行载体构建;设计anti-miR-129-5p,将设计的小干扰RNA anti-miR-129-5p嵌合于tRNA支架,在大肠杆菌中重组表达。
4.如权利要求3所述的重组基因的制备方法,其特征在于,所述小干扰RNA anti-miR-129-5p的序列为SEQ ID NO:2。
5.如权利要求4所述的重组基因的制备方法,其特征在于,所述嵌合序列为与SEQ IDNO:2序列相似度达90%以上的序列。
6.如权利要求2所述的重组进一步的制备方法,其特征在于,所述tRNA支架的序列为与人丝氨酸tRNA序列相似度达90%以上的序列,所述人丝氨酸tRNA序列为SEQ ID NO:3。
7.如权利要求3所述的重组基因的制备方法,其特征在于,所述小干扰RNA anti-miR-129-5p的前体序列为成熟序列部分被anti-miR-129-5p序列取代的hsa-miR-34a前体序列,所述小干扰RNA anti-miR-129-5p的前体序列为SEQ ID NO:4。
8.如权利要求3所述的重组基因的制备方法,其特征在于,所述重组anti-miR-129的制备方法具体包括以下步骤:
步骤一,设计合成嵌合anti-miR-129-5p序列的hsa-miR-34a前体引物;
步骤二,利用pBSMrnaSeph质粒在tRNA反密码子环处具有的酶切位点,将小干扰RNAanti-miR-129-5p的前体序列插入pBSMrnaSeph质粒中,构建表达载体;
步骤三,将嵌合目标序列的表达载体转化感受态大肠杆菌;
步骤四,大肠杆菌培养扩增后,提取菌内总RNA,以FPLC分离纯化目标重组anti-miR-129-5p。
9.一种抗衰化妆品,其特征在于,所述抗衰化妆品利用利要求1所述的重组基因制备。
10.如权利要求9所述的抗衰化妆品,其特征在于,所述抗衰化妆品的剂型包括膏霜类、乳液类、液洗类和水剂类。
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