[发明专利]一种南美树蛙抗癌肽DMS-PS1及其应用

说明书

本发明公开了一种南美树蛙抗癌肽DMS‑PS1及其应用，它可以用于抗癌药物和保健品以及制备领域，以南美树蛙Phy l lomedusasauvagi i作为材料，从蛙皮分泌物中分离得到了一条新型的天然抗癌肽DMS‑PS1，多肽的开放阅读框均由76个氨基酸组成、含有高度保守的由22个氨基酸残基组成的信号肽、富含天冬氨酸和谷氨酸等酸性氨基酸，其分子量为2931.43道尔顿，C端含有酰胺化修饰，是具有α‑螺旋结构的两亲性阳离子肽，本发明的公开了该天然抗癌肽DMS‑PS1表现出光谱抗癌活性，且对前列腺癌细胞表现出一定的杀伤选择性，研究发现其通过诱导PC‑3细胞凋亡发生抗癌作用，这为癌症的治疗提供了潜在的药物。

技术领域

本发明涉及抗癌药物及其制备领域，具体涉及一种南美树蛙抗癌肽DMS-PS1及其应用。

背景技术

现代医疗、科学科技和经济的迅速发展使得人们的生活方式发生了巨大的改变，人均寿命延长、环境污染等问题也使得恶性肿瘤的发病率和死亡率逐渐升高，成为威胁人类生命的第二大疾病。根据全球癌症报告结果显示，到2020年为止，全世界恶性肿瘤病例大约有1930万，死亡率约为1000万。尽管近年来癌症治疗已经取得了重大进展，但目前用于癌症治疗的主要方式仍比较局限。另外癌症靶向药的研究和应用也越来越多，但化疗药物往往具有毒副作用强和易产生耐药性等缺点。所以急需寻找和开发新型的抗癌药物。

蛙皮和分泌物的存在一直被认为是青蛙抵御捕食者或者保护自身免受环境中微生物入侵的第一道屏障。从青蛙皮肤中分离的宿主防御肽具有广阔的应用前景，因其具有杀菌、抗癌和免疫调节等多种生物活性而备受关注。

发明内容

本发明的目的在于提供一种从南美树蛙Phyllomedusasauvagii蛙皮分泌物中分离鉴定出一条具有抗癌活性的生物活性肽，并确定体外结果发现抗癌肽DMS-PS1能够抑制人非小细胞肺腺癌H157细胞、人星形胶质瘤U251MG细胞、人乳腺癌MB-435S细胞、前列腺癌PC-3细胞的增值，并对前列腺癌PC-3细胞表现出一定的选择性，能够诱导PC-3细胞的凋亡。

为了实现以上目的，本发明采用的技术方案为：以南美树蛙蛙皮分泌物为研究对象，通过揉搓结合电击法来获得蛙皮分泌物，通过分子克隆可获得多肽的转录本、核苷酸序列以及相应的翻译氨基酸序列显示，其翻译的开放阅读框由76个氨基酸残基组成，是由22个残基组成的高度保守的信号肽区域、含有天冬氨酸和谷氨酸残基的酸性区域以及一个由28个氨基酸残基组成的成熟肽区域；来自蛙皮分泌物文库的编码DMS-PS1的cDNA的核苷酸序列和翻译的ORF氨基酸序列为：

进一步的，使用质谱技术进一步验证成熟肽的分子量和一级结构，确定本肽的分子量为2931.43道尔顿，C端含有酰胺化修饰，其氨基酸序列为：GLWKSLFKNVGKAAGKAALNAVTDMVNQ-NH2。

进一步的，采用体外筛选发现其能够抑制人非小细胞肺腺癌H157细胞、人星形胶质瘤U251MG细胞、人乳腺癌MB-435S细胞、前列腺癌PC-3细胞的增值，并对前列腺癌PC-3细胞表现出一定的选择性，能够诱导PC-3细胞的凋亡。因此，所述南美树蛙抗癌肽DMS-PS1可作为制备潜在的抗癌药物。

附图说明

图1为本发明的抗癌肽DMS-PS1癌细胞杀伤测定吸光度示图。

图2为本发明的抗癌肽DMS-PS1癌细胞膜完整性作用测定示图。

图3为本发明抗癌肽DMS-PS1细胞凋亡实验检测结果示图。

具体实施方式

为了能够更清楚地理解本发明的上述目的、特征和优点，下面结合附图和具体实施方式对本发明进行进一步的详细描述。需要说明的是，在相互不冲突的情况下，本申请的实施例及实施例中的特征可以相互组合。

实施例：