[发明专利]一种免疫层析检测通用的样本稀释液及其制备方法

说明书

本申请涉及免疫技术领域，具体公开了一种免疫层析检测通用的样本稀释液及其制备方法。免疫层析检测通用的样本稀释液包括以下质量/体积比的组分：6%‑12%酪蛋白，2%‑20%表面活性剂，1%‑20%防腐剂，5%‑20%海藻糖，0.5%‑1%氯化钠，1%‑10%阻断剂，所述样本稀释液还包括0.04mol/L‑0.06mol/L HEPES缓冲溶液；其制备方法为：配制HEPES缓冲溶液：称取HEPES，加入水并进行定容、过滤和除菌；配制样本稀释液：称取海藻糖、氯化钠、酪蛋白、表面活性剂、防腐剂和阻断剂，并将其与配制完毕的HEPES缓冲溶液混合，形成混合液，搅拌使混合液溶解，最后调节混合液pH值为7‑8。本申请的样本稀释液可通用于不同检测项目，其具有通用性强、检测灵敏度高的优点；另外，本申请的制备方法简易可行，可进行大规模工业化生产。

技术领域

本申请涉及免疫检测技术领域，更具体地说，它涉及一种免疫层析检测通用的样本稀释液及其制备方法。

背景技术

目前动物疾病检测产品的样本稀释液呈现多样化，每个厂家的样本稀释液成分不同，而且同一个厂家的不同检测项目的样本稀释液成分也有所不同，这导致了使用一个样本进行多项目检测时需要增加稀释步骤，样本量需求增多；并且不同试剂盒样本稀释液通常仅针对特定待检物来源样品有效，对其它来源的抗原未必有效，这导致实际检测使用其他类型的样本时灵敏度低、敏感性不好，甚至出现非特异反应，并且影响检测速度，严重时会使病情恶化或导致病毒肆意传播。

针对上述现有技术的不足，本发明人认为亟需提供一种免疫层析检测通用的样本稀释液，以解决上述问题。

发明内容

为了解决现有样本稀释液存在的灵敏度低的问题，本申请提供一种免疫层析检测通用的样本稀释液，使样本稀释液能够检测不同类型的样本，同时达到灵敏度高的效果。

第一方面，本申请提供的一种免疫层析检测通用的样本稀释液采用如下的技术方案：一种免疫层析检测通用的样本稀释液，包括以下质量/体积比(g/ml)组分：6％-12％酪蛋白，2％-20％表面活性剂，1％-20％防腐剂，5％-20％海藻糖，0.5％-1％氯化钠，1％-10％阻断剂，所述样本稀释液还包括0.04mol/L-0.06mol/L HEPES缓冲溶液。

通过采用上述技术方案，HEPES缓冲溶液稳定性好，其浓度在0.04mol/L-0.06mol/L区间时，对细胞没有任何毒性，而且由该缓冲溶液制得的样本稀释液敏感性较强；酪蛋白作为封闭剂，抗原通过与酪蛋白封闭液一起孵育，表面自由空间被酪蛋白封闭液饱和，减少检测抗体与抗原表面的非特异性结合，实现较高的信噪比，使检测达到更佳的灵敏度；表面活性剂在该范围下能够保护蛋白质，协同HEPES缓冲溶液维持蛋白质的稳定性；防腐剂在具有广谱抗菌活性，能在较长的时间内抑制细菌、真菌和酵母菌等微生物的生长，当其与HEPES溶液复配时，能够减少体系的pH值波动幅度；海藻糖作为一种典型应激代谢物，能够在细胞表面形成独特的保护膜，有效地保护生物分子结构不被破坏；氯化钠是HEPES缓冲溶液的最佳复配物，其能够最大程度的维持细胞的渗透压和酸碱平衡；阻断剂用于避免病毒与样本稀释液结合后出现假阳性的情况，保证结果的准确性。

可选的，所述样本稀释液的最优含量为：0.05mol/L HEPES缓冲溶液，10％酪蛋白，2.2％表面活性剂，1％防腐剂，5％海藻糖，0.9％氯化钠，1％阻断剂。

通过上述技术方案，各组分在该限值下，其混合复配后制得的样本稀释液灵敏度最高、敏感性最强，检测速度最快。

可选的，所述表面活性剂为吐温80、曲拉通、S24和十二烷基环酸钠中的其中一种；优选为S24。

通过上述技术方案，S24作为非离子型表面活性剂，在低温条件下仍然具有流动性，渗透性能也优于其它产品。