[发明专利]HAP1在筛选神经炎症治疗药物中的应用

说明书

本发明公开了HAP1在筛选神经炎症治疗药物中的应用，属于生物医药技术领域。本发明中选用HAP1野生型老鼠作为对照组、HAP1杂合子小鼠作为实验组，构建了神经病理急性疼痛，分别检测两组小鼠的术后炎症反应。结果发现，降低HAP1的表达，可以显著减少炎症反应，降低胶质细胞活化水平，抑制了炎症因子的释放；最终发挥了控制神经炎症的作用。这一发现可以为疼痛研究提供新的分子靶点。

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，具体涉及HAP1在筛选神经炎症治疗药物中的应用。

背景技术

神经病理性疼痛是由躯体感觉神经系统的损伤或疾病而造成的疼痛，属于慢性疼痛，主要表现为自发性疼痛、痛觉过敏、异常疼痛和感觉异常等临床特征。由神经系统损伤或功能障碍引起的神经性疼痛是人类最棘手的问题之一。流行病学统计发现约6.9％-10％的慢性疼痛患者具有神经病理性疼痛症状。由于神经性疼痛强烈且持久，常常可抵抗所有可用的镇痛措施，对患者而言不仅是身体的摧残，更是心理的折磨，极大降低了患者的生活质量。同时神经性疼痛病因复杂，有关其具体的发生发展机制尚不十分清楚。因此，深入研究神经性疼痛的分子机制对于寻找新的镇痛靶点十分重要。

背根神经节和脊髓是负责接收和传送伤害性刺激信息，接收和处理刺激信息的初级门户。脊髓通过“闸门控制”机制在局部参与伤害性信息传入的调节，是疼痛信号处理的初级调节中枢。神经病理性疼痛涉及多种分子机制，如：如中枢敏化、胶质细胞激活和增生、炎性因子释放等。脊髓胶质细胞的激活，如小胶质细胞和星形胶质细胞，是中枢神经系统炎症反应(特别是神经炎症)的重要组成部分，在神经性疼痛的发病过程中起着关键作用。众所周知，炎性趋化因子是调节外周免疫细胞运输的调节因子；也表达在中枢神经系统中，参与神经元发育、突触传递和神经炎症等多个通路的调节。炎症因子通过影响神经元-胶质细胞的相互作用，从而参与调节神经性疼痛和炎症性疼痛过程。神经炎性反应始终是神经性疼痛病理机制中的重要组成部分。因此探索炎性相关的分子及机制，对疼痛的研究具有十分重要的作用。

亨廷顿蛋白相关蛋白1(Huntingtin associated protein 1，HAP1)广泛表达在神经系统中，包括大脑、脊髓和背根神经节中表达较高。在神经系统中，HAP1主要参与细胞内囊泡转运，例如脑源性神经营养因子、14-3-3蛋白、鸟嘌呤核苷酸交换因子等；调节膜受体蛋白的循环和表达，包括γ-氨基丁酸A型受体、雄激素受体、L型钙通道、酪氨酸受体激酶A。免疫染色结果显示，70-80％的HAP1阳性神经元与伤害性或机械感受标记物共定位，如CGRP、SP、NOS、TRPV1等，表明HAP1可能参与神经性疼痛的发生发展过程，发挥着特殊的作用。

因此，本发明的主要目的是检测神经性疼痛过程中，HAP1是否参与胶质细胞的激活，以及对炎症因子的表达是否具有调控作用。

发明内容

本发明的目的是提供HAP1在筛选神经炎症治疗药物中的应用。

本发明中，选用HAP1野生型老鼠作为对照组、HAP1杂合子小鼠作为实验组，构建神经病理急性疼痛(SNI)，分别检测两组小鼠的术后炎症反应(星形胶质细胞、小胶质细胞活化水平；促炎因子和抗炎因子的表达水平)。结果发现，降低HAP1的表达，可以显著减少炎症反应，降低胶质细胞活化水平，抑制了炎症因子的释放；最终发挥了控制神经炎症的作用。这一发现可以为疼痛研究提供新的分子靶点。

附图说明

图1为SNI术后一周HAP1野生型小鼠脊髓切片染色结果。其中：Contra代表对照侧，Ipsi代表手术侧；左侧图分别为GFAP染色检测星形胶质细胞的活化程度结果和手术侧放大图片；右侧图分别为Iba1染色检测小胶质细胞的活化程度结果和手术侧放大图片；标尺为100微米。

图2为SNI术后一周HAP1杂合子小鼠脊髓切片染色结果。其中：Contra代表对照侧，Ipsi代表手术侧；左侧图分别为GFAP染色检测星形胶质细胞的活化程度结果和手术侧放大图片；右侧图分别为Iba1染色检测小胶质细胞的活化程度结果和手术侧放大图片；标尺为100微米。