[发明专利]一种鼻腔鼻窦腺样囊性癌类器官培养基培养基及其应用

权利要求书

1.一种鼻腔鼻窦腺样囊性癌类器官培养基培养基，由如下组分组成：Human R-spondin1、Human Noggin、Human Wnt3a、Nicotinamide、N-acetylysteine、Gastin I、Human EGF、Human FGF 10、Human FGF basic、Hydrocortisone、Prostaglandin E2、SB202190、Y-27632Dihydrochloride、B27、A83-01、Insulin-Transferrin-Selenium、L-Glutmax、Triiodothyronine、HEPES。

2.根据权利要求1所述的鼻腔鼻窦腺样囊性癌类器官培养基培养基，其中各组分浓度如下：Human R-spondin 1 10-20ng/ml、Human Noggin 5-15ng/ml、Human Wnt3a 15-40ng/ml、Nicotinamide 5-10mmol//L、N-acetylysteine 1-1.25mmol//L、Gastin I 2-10mmol//L、Human EGF 10-55ng/ml、Human FGF 1010-20ng/ml、Human FGF basic 5-10ng/ml、Hydrocortisone 100-175ng/ml、Prostaglandin E2 1-2μmol//L、SB202190 10-20ng/ml、Y-27632 Dihydrochloride 100-500nmol//L、B27 0.5-1X、A83-01 100-200nM、Insulin-Transferrin-Selenium 0.5-1X、L-Glutmax 0.5-1X、Triiodothyronine 100-500nmol//L、HEPES5-10mmol//L。

3.根据权利要求2所述的鼻腔鼻窦腺样囊性癌类器官培养基培养基，其中各组分在培养基中的浓度如下：

4.根据权利要求1-3中任一项所述的鼻腔鼻窦腺样囊性癌类器官培养基培养基在培养腔鼻窦腺样囊性癌来源细胞中的应用。

5.根据权利要求1-3中任一项所述的鼻腔鼻窦腺样囊性癌类器官培养基培养腔鼻窦腺样囊性癌来源细胞的方法，所述方法包括：

(1)获取腔鼻窦腺样囊性癌细胞；

(2)将获取的细胞接种至所述培养基中培养。

6.根据权利要求5中所述的方法，每隔14天更换一次所述培养基。

7.根据权利要求5或6所述的方法，其中所述获取腔鼻窦腺样囊性癌细胞的步骤如下：

(1)获取鼻腔鼻窦腺样囊性癌组织；

(2)将鼻腔鼻窦腺样囊性癌组织进行破碎形成组织小块；

(3)对所述组织小块的组织粘液进行溶解获得干净的组织小块；

(4)对所述干净的组织小块进行组织消化，形成消化后的组织；

(5)对消化后的组织进行中止消化；

(6)对中止消化的组织进行离心，获取组织沉淀，对所述组织沉淀进行过滤后再离心，去除上清，加入裂解液裂解后再终止裂解，对细胞进行计数后，再离心得到腺样囊性癌细胞沉淀；

(7)根据总细胞量加入基质胶以及细胞计数结果加入Advanced DMEM/F12培养基，吹散混匀形成含有数个细胞的细胞团。

8.一种根据权利要求5-7所述的方法培养的细胞。

9.一种根据权利要求8中的细胞制备的鼻腔鼻窦腺样囊性癌类器官。

10.根据权利要求9中的鼻腔鼻窦腺样囊性癌类器官在药物筛选中的应用。