[发明专利]SARS-CoV-2编码蛋白来源的T细胞表位多肽FAFPFTIYSL及其应用

说明书

本发明涉及生物医学技术领域，具体涉及新型冠状病毒(SARS‑CoV‑2)编码蛋白来源的T细胞表位多肽FAFPFTIYSL及其应用。所述多肽的氨基酸序列为FAFPFTIYSL，其具有诱导SARS‑CoV‑2特异性T细胞，协助控制SARS‑CoV‑2感染和病毒清除的特性。本发明还包含编码所述多肽表位的融合蛋白、核苷酸序列或其互补序列的核酸分子，以及含有所述核酸分子的载体，以及包含所述多肽、融合蛋白、核酸分子或载体作为活性成分的药物组合物，以及所述多肽、融合蛋白、核酸分子、载体、药物组合物的用途。

技术领域

本发明涉及生物医学技术领域，具体涉及新型冠状病毒(SARS-CoV-2)编码蛋白来源的T细胞表位多肽FAFPFTIYSL及其应用。

背景技术

由SARS-CoV-2引起的新型冠状病毒肺炎(COVID-19)是世界范围内当前最为迫切急需解决的公共卫生问题。

靶向SARS-CoV-2编码的病毒蛋白(不局限于S蛋白)的特异性T细胞反应存在于COVID-19患者体内，在抑制SARS-CoV-2感染、病毒清除中发挥着重要的作用，可能有助于患者康复。近期的多项研究证实COVID-19重症患者体内T淋巴细胞数量会显著的较轻症患者少，表明T细胞在控制或杀灭病毒方面发挥着重要作用。同时，针对COVID-19患者的临床研究证实，部分患者在体内靶向结构蛋白的中和性抗体持续阴性的情况下也能清除病毒的感染。多项研究表明靶向SARS-CoV-2结构蛋白的中和性抗体在体内存在的时间较短。相较而言特异性记忆性T细胞在体内存活的时间会显著的较长，这一特点在针对与SARS-CoV-2高度相似的MERS-CoV(中东呼吸综合征冠状病毒)和 SARS-CoV-1(严重急性呼吸综合征冠状病毒)的研究中已经得到了验证。

此外，在一项使用缺乏T细胞和B细胞的免疫缺陷小鼠作为宿主的模型中，研究者发现给感染了SARS-CoV-1(MA15 strain,Mouse Adapted 15strain)的小鼠回输经一个SARS-CoV-1S蛋白来源的T细胞表位(S366)诱导的病毒特异性CD8+T细胞能加速病毒在小鼠体内的清除以及临床病理的恢复。使用上述表位对具有正常免疫系统的BALB/C小鼠进行免疫，7天后使用致死剂量的 SARS-CoV-1感染小鼠，发现经免疫的小鼠能加速病毒在体内的清除以及100％免于病毒的致死作用；相反，未经免疫或经空载树突状细胞免疫的小鼠的死亡率分别为70％和50％。在另一项更进一步的研究T细胞表位作为疫苗对 SARS-CoV-1的感染提供持续性保护的动物实验中，研究者使用一个 SARS-CoV-1S蛋白来源的T细胞表位(S525)对BALB/C小鼠进行免疫，发现这个表位能诱导剧烈的T细胞免疫反应，且能在肺部和脾脏中检测到病毒特异性T细胞的存在。为了研究病毒特异性记忆型T细胞的保护作用，在免疫后的第42-45天，使用致死剂量的SARS-CoV-1感染小鼠，发现经表位S525免疫的小鼠有80％的存活，相比之下，未免疫和使用GFP免疫的对照组小鼠存活率分别为0和20％。在SARS-CoV-1感染康复者体内检测到病毒特异性记忆型CD8+T 细胞能持续存在并维持功能达11年之久，而在此时间点，中和性抗体以及能产生中和性抗体的B细胞均不能检测到。相似的，使用MERS-CoV感染的小鼠模型也发现，被一个MERS-CoV的T细胞表位免疫的小鼠能加速病毒清除，更快的从感染状态恢复。这些研究结果表明CoV(冠状病毒)抗原特异性T细胞介导的细胞免疫应答在控制CoV感染和病毒清除中发挥着重要作用。

当抗原呈递细胞(Antigen Presenting Cell,APC)或被病毒感染的宿主细胞表达病毒蛋白后，胞浆中的病毒蛋白质抗原会被蛋白酶体降解成肽段，经转运、加工后与人类白细胞抗原(Human Leukocyte Antigen,HLA)类分子结合，形成抗原肽—HLA分子复合物，转移至细胞表面，被T细胞识别，活化T细胞。有效激发特异性T细胞免疫应答发挥抗病毒效能的关键在于鉴定SARS-CoV-2编码蛋白来源的T细胞表位，这对开发安全有效的基于T细胞抗原表位的 COVID-19预防性和治疗性多肽疫苗有重要意义。

发明内容