[发明专利]一种翘芪复方中药汤剂来源的微小核糖核酸及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种翘芪复方中药汤剂来源的微小核糖核酸，其特征在于，所述微小核糖核酸选自novel_mir7、novel_mir33、novel_mir35、novel_mir10、novel_mir20、novel_mir5、novel_mir36、novel_mir28、novel_mir31、ppt-miR894、novel_mir32、novel_mir21、pab-miR3711、QQ_159或bdi-miR159a-3p；其中，

所述novel_mir7的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；

所述novel_mir33的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示；

所述novel_mir35的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示；

所述novel_mir10的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示；

所述novel_mir20的核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示；

所述novel_mir5的核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示；

所述novel_mir36的核苷酸序列如SEQ ID NO.7所示；

所述novel_mir28的核苷酸序列如SEQ ID NO.8所示；

所述novel_mir31的核苷酸序列如SEQ ID NO.9所示；

所述ppt-miR894的核苷酸序列如SEQ ID NO.10所示；

所述novel_mir32的核苷酸序列如SEQ ID NO.11所示；

所述novel_mir21的核苷酸序列如SEQ ID NO.12所示；

所述pab-miR3711的核苷酸序列如SEQ ID NO.13所示；

所述QQ_159的核苷酸序列如SEQ ID NO.14所示；

所述bdi-miR159a-3p的核苷酸序列如SEQ ID NO.15所示。

2.根据权利要求1所述的一种翘芪复方中药汤剂来源的微小核糖核酸，其特征在于，所述微小核糖核酸为QQ_159，包括人工合成的QQ_159、植物QQ_159、QQ_159的前体形式或QQ_159的成熟体形式。

3.权利要求1或2所述一种翘芪复方中药汤剂来源的微小核糖核酸的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤1)将300mL翘芪复方中药汤剂分装于50mL除酶离心管中，2000rpm离心去除杂质；按每管10mL吸取上清置于冰上，按药汤体积3倍比例加入TRIzolls 30mL，用力震荡均匀后，室温静置10min，然后加入6mL氯仿，用力震荡均匀，静置10min；

步骤2)离心10000g，4℃，10min，收集上清；

步骤3)加入等体积的异丙醇-20℃沉淀1h，然后离心12000g，15min；

步骤4)小心弃上清，加入5mL的75％的乙醇洗沉淀，4℃，12000g离心5min；

步骤5)离心后，小心弃去乙醇，留沉淀，待沉淀干燥后加200μL 65℃DEPC水溶解，测定RNA浓度；

步骤6)用商用miRNA isolation kit纯化miRNA，每个柱子过100μg RNA，每管用60μLDEPC水溶解；

步骤7)测定miRNA浓度，冷冻干燥8h后，-80℃保存。

4.权利要求2所述一种翘芪复方中药汤剂来源的微小核糖核酸在制备抑制流行性感冒病毒复制的药物中的应用。

5.权利要求2所述一种翘芪复方中药汤剂来源的微小核糖核酸在制备治疗病毒性流行性感冒的药物中的应用。

6.根据权利要求4或5所述的应用，其特征在于，所述流行性感冒包括乙型victoria流行性感冒或H5N1禽流感。

7.权利要求2所述一种翘芪复方中药汤剂来源的微小核糖核酸在制备抑制SARS-CoV-2病毒复制的药物中的应用。

8.权利要求2所述一种翘芪复方中药汤剂来源的微小核糖核酸在制备治疗SARS-CoV-2病毒引起的病毒性肺炎的药物中的应用。