[发明专利]用功能化纳米颗粒将人类体细胞直接重编程为选定的(预定的)分化细胞

权利要求书

1.一种诱导体细胞分化为目的特定细胞类型的组合物，所述组合物包含：

至少一种特定细胞类型诱导剂，所述特定细胞类型诱导剂通过中心纳米颗粒上的第一官能团与所述纳米颗粒缀合；和

第一接头分子，所述第一接头分子连接所述第一官能团和所述至少一种特定细胞类型诱导剂；

其中所述至少一种特定细胞类型诱导剂包含一种或更多种蛋白质分子和一种或更多种RNA分子的组合，所述蛋白质分子和所述RNA分子包括：Oct4、Sox2、Klf4、Lin28,Nanog、Mir-302bcad/367、Mir-302、Mir-200c、Mir-369、Tbx5、Mef2c、Gata4、Mesp1、Mir-1-1、Mir-1、C-Myc、CHIR99021、A83-01、BIX01294、AS8351、SC1、Y27632、OAC2、SU16F、JNJ10198409、Brn2、Ascl1、Mytl1、Zic1、NeuroD、Mir-9、Mir-124、Lmx1a、FoxA2、Lhx3、Ngn2、Hb9、Isl1、HNF1-alpha、Foxa3、HNF4-alpha、Foxa1、FoxA2、FoxA3、Ngn3、Pdx1、MafA、VP16、Gata1、Gata2、Gata3、MyoD、Mir-133、Mir-143、Mir-145、Mir-2861、Mesp1、Myocd、Hand2、Oxa3或Pax6。

2.权利要求1的组合物，其中所述特定细胞类型为心肌样细胞(iCM)、肝细胞、神经细胞、诱导多能干细胞(iPAC)、β细胞、血液祖细胞、肌细胞或成骨细胞。

3.权利要求1的组合物，其中所述至少一种特定细胞类型诱导剂包含两种、三种、四种、五种或更多种蛋白质分子和RNA分子。

4.权利要求2的组合物，其中所述特定细胞类型为神经细胞，并且所述特定细胞类型诱导剂的组合包含选自由PAX6,SOX2,Brn2,Ascll,Mytll,Zicl,NeuroD l,Mir-9,Mir-124,Lmxla,FoxA2,Oct4,Klf4,C-Myc,Lhx3,Ngn2,Hb9和Isll组成的组的至少一种试剂。

5.权利要求2的组合物，其中所述特定细胞类型为诱导多能干细胞(iPAC)，并且所述特定细胞类型诱导剂的组合包含选自由SOX2,Oct4,Klf4,C-Myc,Lin28,Nanog,Mir-302/bcad/367,Mir-302,Mir-200c和Mir-369组成的组的至少一种试剂。

6.权利要求2的组合物，其中所述特定细胞类型为肝细胞，并且所述特定细胞类型诱导剂的组合包含选自由Gata4,HNF1-alpha,Foxa3,HNF4-alpha,Foxa1和Foxa2组成的组的至少一种试剂。

7.权利要求2的组合物，其中所述特定细胞类型为心肌样细胞(iCM)，并且所述特定细胞类型诱导剂的组合包含选自由Gata4,MEF2C,TBX5,MESP1,Hand2,MYOCD,miR-1,Oct4,Sox2,Klf4,C-Myc,CHIR99021,A83-01,BIX01294,AS8351,SC1,Y27632,OAC2,SU16F,JNJ10198409和miR-133组成的组的至少一种试剂。

8.权利要求1的组合物，其中所述RNA分子包含微小RNA、编码转录因子的RNA、siRNA或shRNA。

9.权利要求1至7中任一项的组合物，进一步包含穿透肽(CPP)，其通过所述纳米颗粒上的第二官能团与所述纳米颗粒缀和。

10.权利要求1的组合物，其中所述纳米颗粒的直径小于100nm。

11.权利要求10的组合物，其中所述纳米颗粒的直径小于75、50、40或30nm。