[发明专利]一种RGD/KLA整合脂肽的制备及抗肿瘤作用

权利要求书

1.一种抗癌脂肽，其特征在于，其从N端到C端的序列为C₈H₁₅O-Lys-Ala-Leu-Lys-Ala-Leu-Lys-Lys-Ala-Leu-Lys-Ala-Leu-Lys-Asp-Gly-Arg，其中Lys为赖氨酸，Ala为丙氨酸，Leu为亮氨酸，Asp为天冬氨酸，Gly为甘氨酸，Arg为精氨酸，C₈H₁₅O表示正辛酸，抗癌脂肽结构式如下：

2.抗癌脂肽C₈H₁₅O-Lys-Ala-Leu-Lys-Ala-Leu-Lys-Lys-Ala-Leu-Lys-Ala-Leu-Lys-Asp-Gly-Arg的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)Fmoc-Lys(Boc)-Ala-Leu-Lys(Boc)-Ala-Leu-Lys(Boc)-Lys(Boc)-Ala-Leu-Lys(Boc)-Ala-Leu-Lys(Boc)-Asp(OtBu)-Gly-Arg(Pbf)-Wang Resin的合成；

通过固相合成法合成了Fmoc-Lys(Boc)-Ala-Leu-Lys(Boc)-Ala-Leu-Lys(Boc)-Lys(Boc)-Ala-Leu-Lys(Boc)-Ala-Leu-Lys(Boc)-Asp(OtBu)-Gly-Arg(Pbf)-Wang Resin样品；使用DMF对Fmoc-Arg(Pbf)-Wang Resin进行溶胀，溶胀30min；取少量树脂进行茚三酮检测，若没有颜色变化，则加入含有20％哌啶的DMF溶液反应30min脱去Fmoc保护基；依次用DMF、DCM、DMF对树脂进行冲洗，冲洗完成后再用无水DMF对树脂进行溶胀，时间为30min；溶胀完成后，加入2倍当量的氨基酸和2.6倍当量的DCC、HOBT、DIEA进行反应，反应时间为48h以上；透析完成后，取少量树脂进行茚三酮检测，若没有颜色变化，则说明相应的氨基酸已被连接；然后，依次用DMF、DCM、DMF对树脂进行冲洗，用透析袋(MW8000-14000)置于95％乙醇中进行透析，透析20次以上，每次透析时间为30min；重复上述步骤，直至合成Fmoc-Lys(Boc)-Ala-Leu-Lys(Boc)-Ala-Leu-Lys(Boc)-Lys(Boc)-Ala-Leu-Lys(Boc)-Ala-Leu-Lys(Boc)-Asp(OtBu)-Gly-Arg(Pbf)-Wang Resin样品。

(2)C₈H₁₅O-Lys-Ala-Leu-Lys-Ala-Leu-Lys-Lys-Ala-Leu-Lys-Ala-Leu-Lys-Asp-Gly-Arg的合成；

首先将Fmoc-Lys(Boc)-Ala-Leu-Lys(Boc)-Ala-Leu-Lys(Boc)-Lys(Boc)-Ala-Leu-Lys(Boc)-Ala-Leu-Lys(Boc)-Asp(OtBu)-Gly-Arg(Pbf)-Wang Resin按照(1)中步骤脱除Fmoc基团得到Lys(Boc)-Ala-Leu-Lys(Boc)-Ala-Leu-Lys(Boc)-Lys(Boc)-Ala-Leu-Lys(Boc)-Ala-Leu-Lys(Boc)-Asp(OtBu)-Gly-Arg(Pbf)-Wang Resin，并将其进行冻干处理；将2.5倍当量的NHS、EDC，2倍当量的正辛酸放在无水DMF中活化5h，再加入冻干后的树脂反应48h；反应完成后依次用DMF、DCM、DMF对树脂进行冲洗，将树脂装于透析袋(MW8000-14000)，进行透析，透析20次以上，每次透析时间为30min；透析完成后，对其进行冲洗；对得到的样品进行冷冻干燥，加入切割液(TFA：H₂O：Tis＝95:2.5:2.5)切割掉侧链保护基团和树脂，得到目标脂肽C₈H₁₅O-Lys-Ala-Leu-Lys-Ala-Leu-Lys-Lys-Ala-Leu-Lys-Ala-Leu-Lys-Asp-Gly-Arg。

3.权利要求1所述抗癌脂肽C₈H₁₅O-Lys-Ala-Leu-Lys-Ala-Leu-Lys-Lys-Ala-Leu-Lys-Ala-Leu-Lys-Asp-Gly-Arg在制备抗肿瘤药物中的应用。