[发明专利]一种粪便保存液及粪菌悬液的制备方法

说明书

本发明涉及粪菌保存技术领域，具体公开了一种粪便保存液及粪菌悬液的制备方法。所述的粪便保存液，其包含如下重量份的组分：甘油20～40份；水60～80份；乙二胺四乙酸二钠1～5份；氯化钠1～3份；柠檬酸钠1～3份；提取物1～3份。所述的粪菌悬液的制备方法，包含如下步骤：取粪便，然后加入粪便保存液，混合均匀后即得所述的粪菌悬液。本发明所述的粪便保存液可以有效的提高粪便中微生物DNA的稳定性，可以显著的延长粪便在常温下的保存时间；进而使得粪便无需在液氮冷冻的情况下在常温下能够长时间保存。进一步地，采用本发明所述的粪便保存液在低温下保存粪便，其具有更长的保存时间；能够长时间维持菌群的稳定和活性。

技术领域

本发明涉及粪菌保存技术领域，具体涉及一种粪便保存液及粪菌悬液的制备方法。

背景技术

粪菌移植(Fecal microbiota transplantation，FMT)，是指将健康人粪便中的功能菌群移植到患者胃肠道内，在患者肠道内重建新的肠道菌群，从而实现肠道及肠道外疾病的治疗。据现有技术报道，粪菌移植技术已经被用于治疗复发性或难治性艰难梭菌感染、功能性便秘、炎症性肠病肠易激综合征以及肝硬化和自闭症等疾病。

然而粪菌移植过程中，需要采集健康人的粪便，粪便离开人体后，其微生物菌群稳定性会受到影响；通常需要将采集后的粪便放置在液氮中进行速冻。然而对于采集后需要运输的粪便，在没有进行速冻的情况下，粪便中的微生物DNA是极不稳定的。因此，开发一种能够在常温下保存粪便，并且能够保证粪便中微生物DNA稳定的粪便保存液，具有重要的应用价值。

发明内容

为了克服现有技术中存在的至少之一的技术问题，本发明提供了一种粪便保存液及粪菌悬液的制备方法。

本发明所要解决的上述技术问题，通过以下技术方案予以实现：

本发明首先提供了一种粪便保存液，其包含如下重量份的组分：

甘油20～40份；水60～80份；乙二胺四乙酸二钠1～5份；氯化钠1～3份；柠檬酸钠1～3份；提取物1～3份。

本发明提供了一种全新组成的粪便保存液，所述的粪便保存液通过添加特定方法制备得到的提取物，可以有效的提高粪便中微生物DNA的稳定性，显著的延长了粪便在常温下的保存时间；进而使得粪便无需在液氮冷冻的情况下仅仅在常温下就能够长时间保存。

优选地，所述的粪便保存液，其包含如下重量份的组分：

甘油30～40份；水70～80份；乙二胺四乙酸二钠1～3份；氯化钠1～2份；柠檬酸钠1～2份；提取物2～3份。

最优选地，所述的粪便保存液，包含如下重量份的组分：

甘油30份；水70份；乙二胺四乙酸二钠2份；氯化钠1.5份；柠檬酸钠1份；提取物2份。

优选地，所述的提取物通过如下方法制备得到：

取羊栖菜以及紫菜，然后用有机溶剂进行提取，得提取液，将提取液浓缩干燥后即得所述的提取物；

其中，羊栖菜与紫菜的重量比为1:1～3；

最优选地，羊栖菜与紫菜的重量比为1:2。

优选地，所述的有机溶剂由正丁醇与甲醇组成；其中正丁醇与甲醇的体积比为3～5:1；

最优选地，正丁醇与甲醇的体积比为4:1。

优选地，羊栖菜以及紫菜的总重量与有机溶剂的用量比为1g:5～15mL。

最优选地，羊栖菜以及紫菜的总重量与有机溶剂的用量比为1g:8～10mL。