[发明专利]一株大菱鲆来源的杀鲑气单胞菌弱毒株及其应用

说明书

本发明公开了一株大菱鲆来源的杀鲑气单胞菌弱毒株及其应用，其中，所述弱毒株是杀鲑气单胞菌杀日本鲑亚种的高温衍生株——杀鲑气单胞菌AS‑1，分类命名为杀鲑气单胞菌AS‑1 Aeromonas salmanicida AS‑1，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址为中国武汉，保藏日期为2022年02月18日，保藏编号为CCTCC NO：M 2022131。经人工感染，该杀鲑气单胞菌AS‑1对大菱鲆毒性较低，应用其制备活疫苗对大菱鲆进行免疫保护，可有效预防杀鲑气单胞菌杀日本鲑亚种引起的细菌病，对减少抗生素类药物滥用、保障水产品质量安全具有积极作用。

技术领域

本发明涉及一株细菌弱毒株及其应用，具体涉及一株大菱鲆来源的杀鲑气单胞菌弱毒株及其应用，属于病原微生物筛选技术领域。

背景技术

大菱鲆属鲽形目鲆科菱鲆属，是北方工厂化养殖的重要种类。近年来，随着养殖集约化水平的不断提高，养殖过程中出现了严重的细菌性病害，制约了行业的绿色高质量发展。

杀鲑气单胞菌主要感染冷水鲑鳟鱼类，近年来也有感染鮨科、鲤科、鳎科、鲆科等鱼类的报道。细菌分类鉴定手册将杀鲑气单胞菌（Aeromonas salmonicida）分为5个亚种，一般将杀鲑亚种（A. salmonicida subsp. salmonicida）称为典型株（typical），将无色亚种（A. salmonicida subsp. achromogenes）、杀日本鲑亚种（A. salmonicida subsp.masoucida）、史氏亚种（A. salmonicida subsp. smithia）和溶果胶亚种（A. salmonicidasubsp. pectinolytica）及不符合典型株亚种特性的菌株称为非典型株（atypical）。与典型株的高度同质化不同，非典型株引起的病症以脓肿、溃疡、红斑等非典型疖疮为主，不同非典型株在生理生化、分子特性、致病能力与临床症状等方面多存在差异。

疫苗是一种绿色、高效的免疫保护方式，通过使鱼体产生特异性免疫进而达到抵抗特定病原感染的目的。疫苗可以有效解决抗生素使用引发的病原菌耐药、环境污染及食品安全等问题。有研究表明，以感染鲑鳟鱼类分离获得的杀鲑气单胞菌商用疫苗不能对大菱鲆起到很好的免疫保护作用，且由不同亚种制备的疫苗不能同时保护杀鲑气单胞菌典型株与非典型株引起的感染，需针对不同分离来源、不同亚种制备专门的疫苗。因此，研究制备大菱鲆来源的亚种专用疫苗具有重要意义。

杀鲑气单胞菌主要为嗜冷种群，最适生长温度在20℃左右，而病原菌分离培养的最常用温度是28℃。有研究表明杀鲑气单胞菌中某些对温度敏感的基因或质粒在25℃以上的高温培养下会发生缺失、插入或重排，进而出现某些基因丢失的减毒衍生群体。这些高温下衍生出现的减毒株在感染宿主过程中，常因缺失某部分基因而影响入侵，进而表现为无毒或弱毒，这类弱毒株可作为活疫苗的候选。

发明内容

本发明的目的在于提供一种大菱鲆来源的杀鲑气单胞菌杀日本鲑亚种高温衍生株及其疫苗应用。

为了实现上述目标，本发明采用如下的技术方案：