[发明专利]一种基于磁性纳米颗粒复合工程化外泌体的脑胶质瘤靶向系统及其应用

权利要求书

1.一种基于磁性纳米颗粒复合工程化外泌体的脑胶质瘤靶向系统，其特征在于，所述脑胶质瘤靶向系统包括：磁性纳米颗粒以及工程化外泌体，所述磁性纳米颗粒与工程化外泌体通过抗原抗体反应连接；

其中，所述磁性纳米颗粒具有核壳结构，其以氧化铁颗粒为核心，表面包覆有介孔二氧化硅；

所述工程化外泌体来源于人的间充质干细胞；

所述工程化外泌体修饰有脑部靶向肽；

所述磁性纳米颗粒表面通过介孔二氧化硅的介孔结构包裹药物；

所述药物为小分子化疗药物，所述小分子化疗药物为布喹那；

所述磁性纳米颗粒表面还修饰有抗体；所述抗体为CD63抗体；

所述工程化外泌体还包覆有药物，所述药物为小干扰RNA，所述小干扰RNA为siGPX4；

所述脑部靶向肽为ANG肽和溶酶体相关膜蛋白2B LAMP2B。

2.权利要求1所述脑胶质瘤靶向系统的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括：

S1、构建磁性纳米颗粒；

S2、构建工程化外泌体；

S3、将磁性纳米颗粒与工程化外泌体进行结合形成复合物。

3.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤S1中，方法包括：构建以氧化铁颗粒为基核，介孔二氧化硅为壳的磁性纳米颗粒。

4.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，具体方法包括：

S1.1合成氧化铁纳米颗粒：将三氯化铁和油酸溶于无水乙醇、去离子水和正己烷混合溶液中，在60-80℃恒温反应1-5h；萃取产物并干燥后得固体油酸铁混合物，将油酸铁和油酸混合，在氮气环境中溶于1-十八烯，上述反应体系以恒定速度升温至300-350℃，恒温10-60min，溶液由最初透明变为棕黑色；冷却至室温；离心沉淀即得；

S1.2合成氧化铁-二氧化硅纳米颗粒：将步骤S1.1制得的氧化铁纳米颗粒加入三氯甲烷与CTAB混合物中，超声混匀；向上述溶液中加入水，恒温60-80℃搅拌；顺次向反应体系中加入氢氧化钠溶液、正硅酸四乙酯，恒温1-3h；离心，洗涤即得；

构建成功的磁性纳米颗粒修饰有抗体，采用接枝方式进行修饰连接；将步骤S1.2制得的氧化铁-二氧化硅纳米颗粒溶于PBS，加入EDC、sulfo-NHS，静置后加入氢氧化钠溶液，再加入CD63抗体，孵育，离心洗涤后重分散于PBS中即得。

5.如权利要求4所述的制备方法，其特征在于，具体方法包括：

S1.1合成氧化铁纳米颗粒：将三氯化铁和油酸溶于无水乙醇、去离子水和正己烷混合溶液中，在70℃恒温反应4h；萃取产物并干燥后得固体油酸铁混合物，将油酸铁和油酸混合，在氮气环境中溶于1-十八烯，上述反应体系以恒定速度升温至320℃，恒温30min，溶液由最初透明变为棕黑色；冷却至室温；离心沉淀即得；

S1.2合成氧化铁-二氧化硅纳米颗粒：将步骤S1.1制得的氧化铁纳米颗粒加入三氯甲烷与CTAB混合物中，超声混匀；向上述溶液中加入水，恒温70℃搅拌；顺次向反应体系中加入氢氧化钠溶液、正硅酸四乙酯，恒温2h；离心，洗涤即得。

6.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，具体方法包括：

所述步骤S2中，方法包括：

将pcDNA GNSTM-3-RVG-10-Lamp2B-HA质粒其中的RVG肽点突变为Angiopep-2肽，从而构建N端携带GNSTM糖基化基序，C端携带HA标签的ANG-LAMP2B的融合基因；

将携带上述融合基因的质粒转染进入人间充质干细胞hMSC，随后用超速离心的办法获取携带ANG肽修饰的工程化外泌体；

所述工程化外泌体还含有小干扰RNA，所述小干扰RNA为siGPX4；采用电穿孔方式处理工程化外泌体，从而使得小干扰RNA进入工程化外泌体中。

7.权利要求1所述脑胶质瘤靶向系统在制备脑胶质瘤药物中的应用。

8.一种药物，其特征在于，所述药物至少包含如权利要求1所述的脑胶质瘤靶向系统；所述药物还包括药学上可接受的载体或辅料。

9.一种脑胶质瘤靶向装置，其特征在于，所述装置包含：

a)权利要求1所述脑胶质瘤靶向系统或权利要求8所述药物；

b)具磁性的头盔。