[发明专利]一种鼠抗林麝IgG单克隆抗体在林麝肺炎克雷伯氏菌抗体检测中的应用

权利要求书

1.一种鼠抗林麝IgG单克隆抗体在林麝肺炎克雷伯氏菌抗体检测中的应用，其特征在于，所述鼠抗林麝IgG单克隆抗体在制备检测林麝肺炎克雷伯氏菌抗体的仪器中的应用。

2.一种林麝肺炎克雷伯氏菌抗体胶体金免疫层析试纸，其特征在于，包括如权利要求1所述的鼠抗林麝IgG单克隆抗体。

3.根据权利要求2所述的林麝肺炎克雷伯氏菌抗体的胶体金免疫层析试纸，其特征在于，包括样品垫、金标垫、NC膜、吸水纸和PVC板，所述PVC板位于最底层，所述NC膜位于所述PVC板上并与所述PVC板连接，所述吸水纸位于所述NC膜的一侧并压住所述NC膜，所述金标垫位于所述NC膜的另一侧并压住所述NC膜，所述样品垫位于所述金标垫的一侧并压住所述金标垫，所述金标垫、吸水纸和样品垫均位于所述PVC板上并与所述PVC板连接，所述NC膜的T线为鼠抗林麝IgG单克隆抗体，所述NC膜的C线为兔抗林麝肺炎克雷伯氏菌多克隆抗体。

4.根据权利要求3所述的林麝肺炎克雷伯氏菌抗体的胶体金免疫层析试纸，其特征在于，所述金标垫的制备包括如下步骤：取金标垫粗品于PBST溶液内浸泡后25-35min后取出并烘干，得到预处理金标垫，将所述预处理金标垫放入金标蛋白溶液内浸泡25-35min后取出并烘干，即得到所述金标垫；

所述样品垫的制备包括如下步骤：取样品垫粗品于pH值为7.0-7.5且浓度为0.01mol/LPBS溶液内浸泡25-35min后烘干，即得到所述样品垫；

所述NC膜的制备包括如下步骤：取所述NC膜粗品于所述PBST溶液内浸泡25-35min后取出并烘干，即得到所述NC膜。

5.根据权利要求4所述的林麝肺炎克雷伯氏菌抗体的胶体金免疫层析试纸，其特征在于，所述金标蛋白溶液的制备包括如下步骤：取1mL的胶体金溶液与50μL浓度为2.5-3.5mg/mL的细菌蛋白混匀后得到混合液，向所述混合液中加入10wt％的BSA溶液至所述BSA的终浓度为1wt％后于3-5℃避光放置50-60min再于800-1200rpm离心8-12min取上清部分，得到初次上清液，将所述初次上清液于3-5℃、10000-14000rpm离心25-35min取上清部分，得到二次上清液；用1wt％的BSA和1wt％的PEG 20000混合溶液重悬所述二次上清液至所述二次上清液体积的20％，即得到所述金标蛋白溶液。

6.根据权利要求5所述的林麝肺炎克雷伯氏菌抗体的胶体金免疫层析试纸，其特征在于，所述PBS溶液、所述PBST溶液、所述10wt％的BSA溶液与所述1wt％的BSA和1wt％的PEG20000混合溶液在加入前还经过过滤，所述过滤用的滤膜孔径为0.22μm。

7.根据权利要求5所述的林麝肺炎克雷伯氏菌抗体的胶体金免疫层析试纸，其特征在于，所述胶体金溶液的制备包括如下步骤：向1wt％的氯金酸溶液中加入2-2.5mL的1wt％的柠檬酸三钠溶液并加热至颜色为酒红色后继续加热5-10min，停止加热，得到前处理溶液，待所述前处理溶液冷却之后加入超纯水定容至100mL，得到粗品溶液，将所述粗品溶液质检合格后即得到所述胶体金溶液。

8.根据权利要求7所述的HRP标记鼠抗林麝IgG单克隆抗体的制备方法，其特征在于，所述质检包括初次质检步骤，所述初次质检包括如下步骤：观察所述粗品溶液是否出现酒红色外的其他颜色或沉淀，若所述粗品溶液未出现酒红色外的其他颜色或沉淀，则所述粗品溶液合格。

9.根据权利要求1所述的HRP标记鼠抗林麝IgG单克隆抗体的制备方法，其特征在于，所述质检还包括二次质检步骤：所述二次质检包括如下步骤，取所述初次质检后的粗品溶液于波长为400-700nm测定吸光值的最高吸收峰是否为525±5nm，若所述初次检测后的粗品溶液的吸光值的最高吸收峰为525±5nm，则所述初次检测后的粗品溶液合格。

10.根据权利要求3所述的林麝肺炎克雷伯氏菌抗体的胶体金免疫层析试纸，其特征在于，所述PBST溶液还包括3-5wt％的蔗糖溶液和0.5-1.5wt％的BSA溶液，所述PBS溶液还包括0.05wt％的Tween-20溶液。