[发明专利]一株人肝内胆管癌细胞株ICC-X3及其应用

说明书

一株人肝内胆管癌细胞株ICC‑X3及其应用，属于微生物动物细胞系领域。提供的肝内胆管癌细胞系为人肝内胆管癌细胞株ICC‑X3，已于2022年02月22日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号：CCTCC NO：C202260。人肝内胆管癌细胞株ICC‑X3可作为肝内胆管癌发生、发展或转移机制研究的细胞模型。人肝内胆管癌细胞株ICC‑X3也可以用于建立肝内胆管癌动物模型。所述人肝内胆管癌细胞株ICC‑X3可以作为研究肝内胆管癌的分化机制、细胞形态及功能异常、肿瘤浸润转移机制及指导临床综合诊治等的细胞模型。

技术领域

本发明属于微生物动物细胞系领域，具体是涉及一株人肝内胆管癌细胞株ICC-X3及其应用。

背景技术

肝内胆管癌(Intrahepatic Cholangiocarcinoma，ICC)是第二常见的肝癌类型，在全球的发病率一直在上升。该肿瘤起源于胆道上皮细胞，其占所有胆管恶性肿瘤的10％～20％；手术只有在疾病早期才有可能的治愈性，而晚期不可切除的患者(70％～90％)预后较差，诊断后的生存时间小于12个月。以吉西他滨单独或联合铂类化疗药的全身化疗和放疗对改善患者的长期生存效果有限。

人类肿瘤细胞系，特别是那些具有完整数据和随访的细胞系，是肿瘤生物学研究的重要工具。20世纪80年代以来，科学家们建立并鉴定了多株胆管恶性肿瘤细胞系，但主要以肝外胆管癌为主，肝内胆管癌的细胞系报道很少。

来自胆道系统原发肿瘤的细胞系对于探索生物学和胆管肿瘤生成、检测药物敏感性、开发分子治疗靶点和耐药性研究耐药机制作用巨大。一个完善的肿瘤细胞系库应该反映出肿瘤表型的多样性并能够提供不同肿瘤异质性的细胞系；考虑到胆道系统肿瘤的不同病因及其与病因和种族相关的遗传变异，使用反映这些特征的适当的临床前模型是很重要的。

2002年，国内建成首例肝内胆管癌细胞系，为肝内胆管癌的基础和临床研究提供重要的细胞实验模型。但是，随着体外传代次数增多,细胞系一些特有的生物学特征会逐渐改变或消失，甚至会产生起源细胞本不具备的特征。另外，很多细胞系被检测到细胞交叉污染的现象，最常见的污染细胞源是HeLa,T-24和M14，使用这些细胞进行研究也会出现错误的结果。通过对从不同地区、不同实验室共收集到37株系的细胞共计46个样品，分别进行种属确认及STR谱分析，发现细胞交叉污染现象严重，错误率达62.6％。生物试剂和参考材料的成本约占总成本的三分之一。错误识别、污染、遗传漂变和克隆进化的细胞系是很多研究不可复制的重要原因，并影响到每个从事细胞研究的人。

新建立的细胞系可以最大程度上保持与原发肿瘤相似的特性，使用这种细胞系进行研究得出的结果最接近人体实际情况。因遗传背景不同，为更好地研究中国人的疾病，建立中国人特有的疾病模型非常必要。基于以上原因，不断建立新的细胞系并淘汰陈旧的细胞系，已经成为研究肝内胆管癌发病机理和治疗方法的重要环节。

发明内容

本发明的目的是提供一种人肝内胆管癌细胞系及其应用。

本发明提供的肝内胆管癌细胞系为人肝内胆管癌细胞株ICC-X3，已于2022年02月22日保藏于中国典型培养物保藏中心，地址：中国武汉武汉大学，邮编：430072，保藏中心保藏编号：CCTCC NO：C202260。

人肝内胆管癌细胞株ICC-X3可作为肝内胆管癌发生、发展或转移机制研究的细胞模型。人肝内胆管癌细胞株ICC-X3也可以用于建立肝内胆管癌动物模型。

本发明采用取自一62岁女性肝内胆管癌手术切除标本转移病灶，经Ⅱ型胶原酶/中性蛋白酶两者混合消化后作原代培养，经细胞培养技术建立了一个肝内胆管癌细胞系，命名为ICC-X3。

本细胞株具有以下生物学特性：

1、细胞贴壁生长，无接触抑制，可出现叠加生长现象。

2、细胞倍增时间接近36h。