[发明专利]一种可检测赖氨酸的荧光探针及其制备方法与应用

说明书

本申请公开一种可检测赖氨酸的荧光探针及其制备方法与应用，荧光探针为（顺式）‑2‑（苯并[d]噻唑‑2‑基）‑3‑（7‑甲基‑9氯‑3H‑吡咯[3,2‑f]喹啉‑1‑基）丙烯腈，将5‑氨基吲哚和乙酰乙酸乙酯用溶剂溶解后，加入无水Na₂SO₄和冰醋酸，搅拌并加热回流。反应液过滤后取滤饼用溶剂洗涤，蒸干溶剂，加入二苯醚，搅拌并加热回流，冷却过滤分离得到中间体化合物B用DMF溶解后，滴加三氯氧磷，搅拌并加热反应。反应后淬灭反应，调节pH，析出沉淀，经柱层析分离得到中间体化合物C；用溶剂溶解后，加入苯并噻唑‑2‑乙腈和碱醇溶液，搅拌并加热回流。反应后冷却，浓缩，过滤，淋洗滤饼得所述赖氨酸荧光探针。

技术领域

本发明属于荧光探针技术领域，具体涉及一种可检测赖氨酸的荧光探针及其制备方法与应用。

背景技术

现有检测赖氨酸的方法，包括比色法、液相色谱法、薄层色谱法、质谱法、发光传感器法、安培生物传感器、电化学检测法和荧光探针法。在这些方法中，荧光探针与其他复杂的方法相比，具有较高的灵敏度和良好的选择性，已被越来越多的研究者所研究。然而,在许多报道中荧光探针同时检测多种氨基酸；也就是说荧光探针对赖氨酸的选择性有待进一步研究。此外，用于检测赖氨酸的有机小分子荧光探针几乎没有报道。

发明内容

解决的技术问题：

本申请针对现有技术的不足，解决了目前没有用于检测赖氨酸的有机小分子荧光探针等技术问题，提供了一种可检测赖氨酸的荧光探针及其制备方法与应用，本发明的目的在于减少其他氨基酸的干扰，提供一种新型的高选择性的快速检测赖氨酸的有机小分子荧光探针，同时提供所述的赖氨酸荧光探针的制备方法，以及提供所述赖氨酸荧光探针的用途，将所述赖氨酸荧光探针应用于定量检测赖氨酸的含量。

技术方案：

为实现上述目的，本申请通过以下技术方案予以实现：

一种可检测赖氨酸的荧光探针，所述荧光探针为(顺式)-2-(苯并[d]噻唑-2-基)-3-(7-甲基-9氯-3H-吡咯[3,2-f]喹啉-1-基)丙烯腈，其结构式为：

进一步地，所述顺式为丙烯腈结构。

一种可检测赖氨酸的荧光探针的制备方法，包括以下步骤：

第一步：按质量份数配比将5-氨基吲哚(式A)0.260-0.268份和乙酰乙酸乙酯0.5-0.54份用40-60份无水乙醇溶剂溶解后，加入无水Na₂SO₄0.423-0.429份和冰醋酸0.6-0.68份，搅拌并加热回流5h；反应液过滤后取滤饼用溶剂40-60份洗涤，蒸干溶剂，加入二苯醚46-50份，搅拌并加热至220-240℃回流1h，冷却至20-30℃过滤分离得到中间体化合物B；

第二步:将0.203-0.2034份中间体化合物B用1.0-2.0份DMF溶解后，冰浴冷却后移至磁力搅拌器，滴加三氯氧磷0.5-1.5份，冰浴搅拌10-20min后，移至油浴锅，升温至20-40℃，反应8h；反应后在冰浴条件下滴加冰水淬灭过量的三氯氧磷，淬灭反应后逐滴滴加氨水调节pH至8-9，析出沉淀棕色固体，经柱层析分离得到中间体化合物C；

第三步:将中间体化合物C0.244-0.245份用溶剂无水乙醇20-30份溶解后，加入苯并噻唑-2-乙腈0.346-0.35份和碱醇溶液1.2-1.6份，搅拌并加热回流12小时，通过薄层色谱法监测反应是否完成；反应后冷却，浓缩，过滤，淋洗滤饼得所述赖氨酸荧光探针。

进一步地，所述第一步中溶剂为无水乙醇。

进一步地，所述第三步中溶剂为无水乙醇，碱醇溶液为氢氧化钾甲醇。